论文部分内容阅读
菱角在我国具有悠久的栽培历史,是一种人们喜爱的蔬果。作为鲜售和加工副产物而丢弃的菱角壳,目前没有有效的开发利用,对环境带来很多负面影响。据报道,植物果实外壳含有丰富的黄酮、多酚、多糖等多种活性成分,其中,黄酮类化合物是具有抑菌、抑癌等多种保健功效的物质,为了综合利用菱角壳资源,本文研究菱角壳黄酮类化合物的提取及纯化工艺,并比较菱角壳黄酮粗提物、纯化物的抑菌、抑肿瘤活性。主要实验结果如下:1.菱角壳黄酮提取工艺的优化。以菱角壳黄酮得率为考察指标,采用单因素试验和Box-Benhnken中心组合试验,优化后菱角壳黄酮提取的最佳工艺参数为温度为60℃,料液比为1:30(mL/g),乙醇浓度为50%,时间30min。在该条件下,菱角壳黄酮得率理论值为2.99%,通过验证试验确定,菱角壳黄酮的实际得率为3.0768%,比理论预测值高3.01%。2.菱角壳黄酮的纯化工艺。筛选出AB-8型大孔吸附树脂纯化菱角壳黄酮,最佳工艺为:吸附流速0.8 mL/min,上样体积110 mL,洗脱剂为340 mL的70%的乙醇溶液,洗脱流速0.8 m L/min,菱角壳黄酮粗提物纯度为17.5%,纯化物纯度为36.75%,纯化倍数2.1。3.菱角壳黄酮提取物的抑菌活性研究。菱角壳黄酮粗提物、纯化物对假单胞菌和金黄色葡萄球菌的抑制效果较好,其中菱角壳黄酮粗提物抑菌的MIC值分别为3.125、12.0mg/mL,菱角壳黄酮纯化物抑菌的MIC均为3.125 mg/mL;基于液体生长曲线分析菱角壳黄酮的抑菌效果,发现浓度为2.5 mg/mL黄酮纯化物对假单胞菌的吸光度增加值小于0.100,对假单胞菌有较强的抑制作用;通过建立假单胞菌在添加菱角壳黄酮纯化物的鸭肉基质中的一级模型,从模型延滞期(LPD)参数数值变化来看,经浓度为2.5 mg/m L菱角壳黄酮纯化物处理的鸭肉0℃储藏期间,LPD大于曲酸对照组,随温度的升高,5、10、15、20℃曲酸对照组的LPD值逐渐大于菱角壳黄酮纯化物处理组,表现出优于菱角壳黄酮纯化物的抑菌特性。4.菱角壳黄酮提取物对肿瘤细胞的抑制研究。菱角壳黄酮粗提物、纯化物均可抑制人胃癌细胞SGC7901、人肝癌细胞Hep G2的增殖。菱角壳黄酮粗提物作用SGC7901 24h后,IC50值为279.64 ug/mL,R2=0.92;菱角壳黄酮纯化物作用Hep G2细胞24 h后IC50值为124.91 ug/mL,R2=0.95;5-Fu组作用SGC7901 24 h线性关系最好,R2=0.96,IC50结果为175.43 ug/mL,结论:菱角壳黄酮纯化物对Hep G2的抑制作用较好。