目前各类化学品的安全性评价,每年需要消耗大量的实验动物。尽管整体动物实验具有准确性较高、发展较为成熟的优势,但其费用高、耗时,且受伦理学限制。因此,减少动物的使用是化学品安全性评价的重要发展方向,其中体外毒性测试方法是一种良好的动物实验替代方法,近年来越来越受到科学家和管理部门的关注。化妆品、农药等接触类物质,依据化学品管理相关法律法规要求,进入市场之前须经过皮肤腐蚀/刺激性测试。人皮肤模型与人类具有更好的相关性,近年来迅速发展,并且在化妆品中得到广泛的应用,但尚未在农药类化学品中进行应用,其可行性和准确性仍需验证。我国作为一个农药生产和使用大国,亟待开发农药的皮肤腐蚀/刺激性的动物替代方法。本研究建立人皮肤模型检测杀菌类农药的腐蚀/刺激性,探讨体外皮肤模型替代农药的动物皮肤安全性评价实验的可行性和影响因素。使用人皮肤成纤维细胞与鼠尾胶原混合培养模拟真皮层,在真皮层上接种人角化细胞,经气液培养形成表皮层,共同构建体外皮肤模型。构建的皮肤模型细胞活性高于0.6,且组织切片的分析结果表明其形态结构与人皮肤组织有很好的相似性。对于构建的人皮肤模型的屏障功能,用1%TritonX-100的半效应时间(ET50)和十二烷基磺酸钠(SLS)的半效应浓度(IC50)来验证,分别为2.2h和1.71mg/mL,满足要求。皮肤模型对已知毒性化学品的腐蚀/刺激性测试,发现腐蚀性的筛选结果完全准确,刺激性的准确率为80%。通过细胞活性和细胞因子测定鉴别化合物的腐蚀/刺激性,并比较体外皮肤模型和动物测试结果的一致性。结果表明,皮肤模型对十种农药的腐蚀性测试中,与动物安全评价测试结果完全一致。在刺激性试验中,细胞因子白介素-1a(IL-1a)作为检测终点提高了体外皮肤模型的灵敏性和准确性,人皮肤模型和动物测试结果的一致性达到80%。目前腐蚀性评价标准对腐蚀性强弱的分级,仍存在不足,为此本实验通过对不同腐蚀性强弱的化学品进行测试,依据相对细胞活性的不同,得出区分待测物腐蚀性等级的标准。研究表明构建的人皮肤模型在对杀菌类农药腐蚀/刺激性测试中初步表现出较好的性能,作为动物替代方法进行农药品安全性评价具有良好的应用前景。