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由核盘菌[Sclerotinia sclerotiorum(Lib.)de Bary]引起的菌核病是油菜上的一种重要病害,在我国长江流域为害严重。近年来,菌核病的生物防治研究引起了国内外许多研究者的重视。盾壳霉(Coniothyrium minitans)是核盘菌的一种重寄生菌,具有防治油菜菌核病的潜能。本文研究了利用油菜秸秆固体发酵盾壳霉,生产分生孢子的条件,研究了盾壳霉分生孢子可湿性粉剂的制备和分析方法,研究了盾壳霉制剂在不同温度下的存活性,最后研究了利用盾壳霉可湿性粉剂控制核盘菌菌核萌发及防治油菜菌核病的效果。 以油菜秸秆为基质,以分生孢子产量、分生孢子萌发特性、抗紫外线和抗高温(40℃)的能力为指标,筛选出适于固体发酵的盾壳霉菌株Chy-1。秸秆基质的含水量对盾壳霉的生长和分生孢子产生存在着显著的影响(P<0.05)。适宜的含水量为油菜秸秆:水=1:3～1:5;发酵周期以12天左右为宜;在每250ml三角瓶中10g油菜秸秆中接种5×10~6～2.6×10~8个孢子范围内,接种量的多少对盾壳霉孢子产量没有显著的影响(P>0.05)。发酵秸秆中营养较全面,基质中分别添加不同碳源(可溶性淀粉、蔗糖、葡萄糖、麦芽糖)和有机氮(酵母粉、小牛浸膏、蛋白胨)的处理得到的盾壳霉分生孢子产量与对照处理的孢子产量差异不显著(P>0.05)。添加不同碳源、氮源得到的孢子的萌发率、抗紫外线和抗高温(40℃)的能力不同,较好的碳源为可溶性淀粉,氮源为酵母粉。按照试验所筛选的培养条件,发酵盾壳霉菌株Chy-1时,在10g油菜秸秆中添加50mL水,添加可溶性淀粉和酵母粉,接种量为5×10~6个孢子/瓶,培养12d,孢子平均产量为2×10~9孢子/g干秸秆。 通过筛选得到了盾壳霉可湿性粉剂的配方。其构成为:分生孢子含量(大于10~8/g),十二烷基苯磺酸钠(1%～1.5%),木质素磺酸钙或钠(5%～10%),黄原胶(1%),硫酸锌(0.1%),抗坏血酸(10%),硅藻土(补100%)。 对盾壳霉可湿性粉剂的质量指标进行了测定。其含水量、润湿时间、pH值、细度悬浮率等指标达到了有关国家标准。此外,文中还提出了适于检测盾壳霉分生孢子含量和可湿性粉剂悬浮率的测定方法。 对盾壳霉可湿性粉剂中的分生孢子存活的测定结果表明,温度是重要的存活影响因子。在4℃下粉剂中的孢子可存活120天,之后存活下降,但下降趋势平缓,210d后从8.6×10~8个/g下降到5.1×10~7个孢子/g。在12℃、20℃、30℃下,40d后孢子的存活下降,下降幅度达2～3个数量级/40d,温度越高孢子存活下降的幅度越大,210d后,20℃、30℃处理的粉剂中检测不到存活的分生孢子。 在油菜播种前,采用分生孢子菌核浸泡和土表喷雾的方法检测盾壳霉对核盘菌菌核萌发的抑制作用。采用分生孢子菌核浸泡能够控制油菜菌核病子囊盘的萌发和增加寄生菌核的频率。2003年10月的试验,4×10~4个孢子/mL、4×10~5个孢子/mL和4×10~6个孢子/mL的盾壳霉浸泡处理的子囊盘萌发数分别为37、30和10个/盆,