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目的:
观察子宫内膜异位症(EM)患者CD4+T cell(Th1,Th2,Treg,Th17)血清中关细胞因子IFN-γ、IL-4、TGF-β和IL-17以及转录因子T-bet、GATA3、RORγt、Foxp3的表达水平,分析Th1/Th2、Th17/Treg细胞平衡状态并探讨其与子宫内膜异位症发生发展的关系。
方法:
1)选取确诊为子宫内膜异位症的病例42例为研究对象,并以18例无子宫内膜异位症的健康女性为对照组。无菌采集实验组和对照组的外周血单个核细胞和血清。
2)子宫内膜异位症临床与辅助诊断标准:临床诊断标准:①渐进性痛经;②慢性盆腔痛;③性交痛;④后穹窿、子宫骶骨韧带或子宫峡部触痛性结节;⑤子宫一侧或双侧可触及囊性或囊实性肿块,可与周围组织粘连成包块;⑥不孕;⑦CA125增高。凡有以上①~③点之一项和④~⑦点之两项,即可作为临床诊断。
腹腔镜检查诊断标准:①子宫直肠窝、后腹膜见多个紫蓝色小点,伴腹腔液增多(常为血性);②子宫骶骨韧带增粗,灰白色结节,伴有疏松粘连,输卵管多数通畅;③卵巢包膜增厚,表面不平、粘连,并常见表面有褐色陈旧性出血斑块,卵巢穿刺得巧克力样陈血。凡有①~③之一者,即可作出腹腔镜检查诊断。
3)用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测血清中的细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-17、TGF-β的水平,计算IL-4/IFN-γ、TGF-β/IL-17的比值。
4)用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(QRT-PCR)技术检测单个核细胞转录因子T-bet、GATA3、RORγt、Foxp3的表达水平。计算Foxp3/RORγt,GATA3/T-bet的比值。
结果:
1.依据《子宫内膜异位症的诊断和治疗规范》,42例EM患者均符合临床诊断标准并经腹腔镜手术及病理检查结果确诊。按照r-AFS进行分期,Ⅰ~Ⅱ期22例,Ⅲ~Ⅳ期20例。无其他免疫性疾病且3个月内均未用激素类药物,也无心、肝、肾等重要器官疾病。2.子宫内膜异位症患者血清相关细胞因子的表达水平
子宫内膜异位症患者血清中IFN-γ、IL-17水平显著低于健康对照组(P<0.01),而IL-4、TGF-β显著高于对照组(P<0.05)。IL-4/IFN-γ和TGF-β/IL-17比值都显著高于对照组(P<0.01)。结合患者病程的进展和临床分期发现,EM组Ⅲ~Ⅳ期患者的IL-4/IFN-γ和TGF-β/IL-17水平显著高于Ⅰ~Ⅱ期的患者。
3.子宫内膜异位症患者CD4+T细胞转录因子表达的改变
子宫内膜异位症患者外周血单个核细胞T-bet和RORγt的表达水平均显著低于健康对照组(P<0.01),而GATA3和Foxp3的表达水平均显著高于健康对照组(P<0.05)。GATA3/T-bet、Foxp3/RORγt的比值也显著高于对照组(P<0.01)。
结论:
子宫内膜异位症(EM)组患者外周血中Th1,Th17细胞相关的细胞因子IFN-γ、IL-17和特异性转录因子T-bet、RORγt表达水平均下降,而Th2和Treg相关细胞因子IL-4、TGF-β,转录因子GATA3、Foxp3的表达水平则明显升高。且在子宫内膜异位症患者IL-4/IFN-γ和TGF-β/IL-17比值均随病程的进展而显著升高。提示在子宫内膜异位症患者可能存在着Th1/Th2和Th17/Treg细胞的平衡失衡,且与病程的发展密切相关。