【摘 要】
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目的： 通过 MDS细胞株和骨髓基质细胞共培养，研究 SPARC过表达对骨髓基质细胞的影响，揭示 SPARC对骨髓基质细胞的作用机制，为临床靶向治疗提供新的线索。 方法： 1.收集了
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目的： 通过 MDS细胞株和骨髓基质细胞共培养，研究 SPARC过表达对骨髓基质细胞的影响，揭示 SPARC对骨髓基质细胞的作用机制，为临床靶向治疗提供新的线索。 方法： 1.收集了近4年来在重庆医科大学附属第一医院确诊为MDS的患者骨髓标本，通过qRT-PCR检测骨髓中SPARC mRNA的表达；2.构建含有 SPARC基因的重组慢病毒载体，转染至人 MDS细胞株 SKM-1细胞，流式细胞术检测转染效率， qRT-PCR检测SKM-1细胞中SPARC mRNA表达；3.将SKM-1细胞与骨髓基质细胞 HS-5细胞直接共培养，实验分为三组（实验组 SKM-1/HBLV-h-SPARC+HS-5；空白组 SKM-1/HBLV-GFP-puro+HS-5；对照组 SKM-1+HS-5）。检测共培养24h后 HS-5细胞生物学的变化：CCK-8法和流式细胞术检测 HS-5细胞增殖、细胞周期与细胞凋亡； qRT-PCR检测bcl-2、bax、p53、fas以及caspase-9 mRNA表达；Western blot检测 bcl-2、 bcl-w和 caspase-8蛋白表达。 结果： 1.MDS患者骨髓中SPARC mRNA表达水平相较于健康对照组显著升高；2.上调 SPARC基因在共培养体系中的表达，可以阻滞细胞周期从而抑制 HS-5细胞增殖，促进 HS-5细胞凋亡。 结论： 1. SPARC在 MDS患者中可能作为一个癌基因；2.在共培养中上调 SPARC的表达，抑制骨髓基质细胞的增殖，促进细胞凋亡。
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