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猪源链球菌是一种人畜共患病原菌。抗生素的广泛使用以及由此导致的抗性基因的水平转移是猪链球菌耐药性问题的原因,而氟苯尼考是兽医临床使用最广泛的抗菌药物,目前急需解决氟苯尼考等常用药物耐药性问题。氟苯尼考耐药基因optrA是第二个被发现可以同时介导恶唑烷酮类和酰胺醇类抗生素耐药的基因,且可在细菌之间发生水平转移。因此,以耐药性基因optrA为切入点,研究猪链球菌氟苯尼考耐药现状以及扩散机制,为医学和兽医临床上氟苯尼考耐药的扩散和防控提供一定的理论依据。本研究在对猪源链球菌分离鉴定的基础上,进行氟苯尼考耐药基因optrA的检测。并对部分optrA阳性菌株进行氟苯尼考等药物敏感性检测,随机挑选几株阳性菌进行接合试验、MLST分型、药敏试验。随后对optrA阳性菌SC317进行三代全基因组测序,分析optrA遗传环境,通过设计引物分别进行ICE环状中间体和optrA环状中间体的扩增,验证是否存在环状中间体,进一步分析氟苯尼考耐药基因optrA的遗传环境和传播机制。对237株链球菌进行optrA基因检测的结果显示,optrA阳性菌株28株,阳性率1 1.8%(28/237),药敏结果显示,大部分株菌株均对氟苯尼考、利奈唑胺、四环素和林可霉素具有较高的耐药性。随机选取的2株含optrA耐药性基因的猪链球菌SC262和SC317为供体菌,分别与受体菌S.suis BAA-853进行接合试验。只有SC317接合成功,接合子的药敏试验结果显示,接合子T-SC317对氟苯尼考、利奈唑胺耐药,说明optrA基因在受体菌中能发挥功能。接合试验结果表明:猪源链球菌携带的optrA基因发生了水平转移,接合效率为2.1×10-8。SC317全基因组测序后发现optrA位于一个两端由同向重复序列的IS1216所形成的假定转座子上,且该假定转座子位于ICESa2603家族中一个串联ICE上,并将此串联ICE命名为串联ICESsuSC317(103.324Kb)。optrA环状中间和ICE环状中间体扩增结果显示:SC317可获得ICE环状中间体以及optrA环状中间体。在这个研究中,我们首次发现了氟苯尼考耐药基因optrA位于ICESa2603家族中的一个串联ICE中。综上所述,本研究在猪源链球菌中检测到了氟苯尼考耐药基因optrA,该基因可能通过转座的形式插入到了 一个ICESa2603家族的串联ICE中,该ICE可以发生水平转移。该研究为氟苯尼考在猪源链球菌中的扩散提供了部分理论解释。