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皮肤直接经历着紫外线(UV)照射,极易出现光老化现象,开发高效低毒的天然抗光老化制剂逐渐成为防护皮肤光老化的重要研究方向。 本文旨在对具有抗皮肤光老化作用的天然化合物进行筛选,并分别从促进胶原合成、抗氧化、抗细胞早衰三方面对有效物质的作用机制进行初步探讨。 本文以MTT检测细胞存活率、ELISA检测胶原蛋白分泌量为考察指标,建立了UVB照射真皮成纤维细胞(Human Dermal Fibroblasts HDF)光老化损伤模型。采用该模型,考察了不同植物来源的16种天然化合物对光老化损伤的HDF细胞的保护作用。研究表明,16种化合物中,3种化合物(2,4-二羟基-6-甲氧基-3,5-二甲基查耳酮(DMC)、安石榴苷、红景天苷)可直接提高光老化细胞的存活率;8种化合物(桑黄素、槲皮素、白杨素、异荭草素、安石榴苷、红景天苷、五味子甲素、五味子丙素)表现出对光老化细胞Ⅰ型胶原蛋白分泌的促进作用。总计共有9种化合物在初筛中表现出对光老化细胞的保护作用。在此基础上,进一步从胶原分泌、抗氧化、抗细胞衰老等方面初步探讨了初筛出的化合物的作用机制。 机制研究表明,上述初筛出的9种化合物中,有7种(桑黄素、槲皮素、白杨素、异荭草素、安石榴苷、红景天苷、五味子丙素)可抑制光老化细胞基质金属蛋白酶(MMP-1)的分泌,说明这些化合物可通过抑制MMP-1,降低胶原蛋白的分解量,从而对光老化细胞进行保护。抗氧化方面,4种化合物(白杨素、DMC、安石榴苷、红景天苷)可显著增加胞内GSH含量;8种化合物(桑黄素、槲皮素、白杨素、DMC、安石榴苷、红景天苷、五味子甲素、五味子丙素)有效降低了氧化应激细胞内MDA的含量,说明这些物质从不同的角度增强细胞内抗氧化能力并改善光老化造成的氧化应激程度。根据β-半乳糖苷酶染色结果可知,有6种物质(桑黄素、槲皮素、白杨素、DMC、安石榴苷、五味子甲素)可以显著降低衰老细胞率,延缓UVB导致的细胞慢性衰老。 综合考虑,UVB照射的人真皮成纤维细胞模型下,桑黄素、槲皮素、白杨素、安石榴苷在抗细胞死亡、抗胶原蛋白流失、抗细胞老化三方面都表现出显著的保护作用,最具有潜在的开发价值。研究结果可为天然提取的抗光老化剂的研究、开发以及实际应用提供理论基础和实验依据。