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目前,DNA生物传感器作为一种新型的传感器,具有高特异性,高灵敏度的特点,并在基础研究以及应用领域受到广泛关注,得到迅速发展。相对于传统的单链DNA,四面体DNA作为识别元件具有更多优点,如结构稳定,杂化效率高,进而导致检测限低,重现性好等。本论文采用四面体结构DNA构建电化学/电化学发光传感器,包括以下三个部分:
第一章:绪论。综述了DNA的基本知识以及DNA生物传感器;接着详细介绍了电化学DNA生物传感器,包括DNA修饰到电极上的方法,单链DNA与四面体DNA修饰金电极的比较,并对不同类型的传感器进行归纳;最后,简要介绍了电化学发光生物传感器,包括电化学发光的特点,原理,以及相对于其他方法的优点。
第二章:利用四面体DNA(ts-DNA)与功能核苷酸(FO)构建DNA电化学生物传感器并成功用于Hg2+测定。首先,将四面体结构DNA(ts-DNA)修饰电极作为电极表面,通过四面体DNA(ts-DNA)和吸附了亚甲基蓝(MB)的功能核苷酸(FO)结合形成稳定的T-Hg-T结构,利用亚甲基蓝MB作为电化学指示剂,采用电化学方法测定Hg2+的浓度。与单链DNA(ss-DNA)比较,四面体DNA(ts-DNA)提高了测定Hg2+的灵敏度,并且不需要使用巯基乙醇来封闭电极,减少了污染。
第三章:利用四面体DNA(ts-DNA)与功能核苷酸(FO)构建DNA生物传感器,利用电化学发光的方法测定ATP。本实验中,使用邻菲罗啉钌作为电化学发光探针,因为其能够嵌插到功能核苷酸FO中。在实验过程中,ATP适配子与存在于FO中能与其互补的序列进行杂交,从而将FO以及电化学发光活泼物质邻菲罗啉钌引入到电极表面。加入ATP后,由于ATP与其适配子的结合能力要大于互补链的结合能力,所以,双链解开,电化学发光信号降低,从而测定ATP的浓度。