基于Ⅰ型胶原蛋白小鼠肝纤维化MR分子探针的制备与应用初探

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目的:合成Ⅰ型胶原蛋白的MR分子探针,并应于用小鼠的肝脏MR成像,以期实现肝纤维化的定性诊断。材料与方法:使用固相法、以各种氨基酸为原料合成Ⅰ型胶原蛋白结合多肽(LRELHLNNNG,TICTP),并利用有机小分子全合成法使用前体轮环藤宁合成交联剂DOTA,随后制备TICTP-DOTA复合物,最后螯合钆离子得到多肽-DOTA-Gd复合物TICTP1,并使用质谱分析及NMR波谱分析确认化学结构。选取昆明小鼠80只,随机分为两组,实验组60只,使用四氯化碳分次腹腔注射法制作肝纤维化小鼠模型,同期每周造模后第一天随机选取两只小鼠尾静脉注射TICTP1后进行MR肝脏T1预扫描,通过观察肝脏组织信号变化,发现造模6周后的小鼠在注射后TICTP1明显升高,对应病理期为F3期(METAVIR标准);对照组腹腔注射相同剂量PBS溶液。分别随机选取注射6周的实验组小鼠及对照组各10只,实验组及对照组分别随机分为两组,每组5只,分别注射TICTP1(0.5μmol/ml,1.5ml/100g体重)及相同浓度剂量的马根维显,行MR肝脏T15min、60min、120 min、180 min扫描,动态观察肝脏信号变化曲线,及肝脏组织与同层面竖脊肌的信号比值。同期取小鼠肝脏组织行病检。使用SPSS 16.0行统计学分析。结果:1.成功合成多肽-DOTA-Gd复合物TICTP1,质谱分析结果与预期相符。2.成功构建不同病理分期的小鼠肝纤维化病理模型。3.根据预实验结果取F3期小鼠进行定性实验,可观察到注射分子探针TICTP1的实验组小鼠肝脏T1信号明显升高,F3期肝纤维化组注射分子探针TICTP1 180min后,小鼠肝脏的MR信号改变与注射马根维显组、正常对照组之间差异均有统计学意义(p<0.05),ROC曲线下面积、敏感度、特异度均为1。而对照组及注射马根维显的实验组小鼠肝脏T1信号未见明显变化(p>0.05)。结论:1.成功合成多肽-DOTA-Gd复合物TICTP1;2.TICTP1可作为小鼠肝纤维化特异性显像的MR分子探针。
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