目的:对可能影响关节假体周围感染(Periprosthetic Joint Infection,PJI)细菌培养结果的一些因素进行基础和临床研究,分析和评估局麻药利多卡因、染色剂亚甲蓝和超声裂解技术是否会对细菌培养的结果产生影响,为针对性地提高细菌培养阳性率提供理论依据。方法:1、体外制备8种标准菌株(金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、人葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、化脓链球菌和白色念珠菌)的菌悬液来模拟关节液细菌培养。所有标准菌株的菌悬液均稀释50倍并分为两组(每组5份),实验组添加2%利多卡因注射液,对照组添加0.45%无菌盐水。将两组混悬液分别接种于琼脂平板培养基上进行24小时定量培养,通过菌落计数比较两组培养基上的细菌生长情况。2、①同方法1制备8种标准菌株的菌悬液。所有标准菌株的菌悬液均稀释50倍并分为三组(每组5份),实验Ⅰ组添加0.1%亚甲蓝注射液,实验Ⅱ组添加0.05%亚甲蓝注射液,对照组添加0.45%无菌盐水。将三组混悬液分别接种于琼脂平板培养基上进行24小时定量培养,通过菌落计数比较三组培养基上的细菌生长情况。②依据改良的肌肉与骨骼感染协会(Muscularskeletal Infection Society,MSIS)诊断标准,将2017年10月至2018年1月在本中心收治的拟行二期髋/膝关节翻修手术的17例PJI患者纳入为研究对象。术中取出至少3份假体周围组织进行细菌培养,将每份组织块平均分为两份,用0.1%亚甲蓝注射液将其中一份组织染色,另一份作为对照组不做染色处理。通过组织培养的结果,比较两组最终的培养阳性率及细菌鉴定情况。3、依据改良的MSIS诊断标准,将2016年11月至2017年12月本院收治的疑似PJI或假体无菌性松动的62例作为研究对象,所有患者均拟行一期或二期翻修手术。将翻修术中取出的假体进行超声裂解处理,并将所得的裂解液进行细菌培养。根据培养结果分别计算敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值。同时比较普通细菌培养和超声裂解液培养的诊断效能差别。结果:1、与0.45%无菌生理盐水组相比,2%利多卡因注射液对7种标准菌株的菌落生长有抑制作用(金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、人葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯杆菌、鲍曼不动杆菌、白色念珠菌),却对化脓链球菌无抑菌作用。其中金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肺炎克雷伯杆菌、鲍曼不动杆菌的生长情况明显受到2%利多卡因抑制(P<0.01),白色念珠菌、大肠杆菌、人葡萄球菌的生长情况也同样受到抑制(P<0.05)。2、①0.1%亚甲蓝注射液和0.05%亚甲蓝注射液对人葡萄球菌和鲍曼不动杆菌均有抑菌作用,对另6种标准菌株均无抑菌作用。其中鲍曼不动杆菌的生长情况明显受到亚甲蓝注射液的抑制(P<0.01),并且抑制程度与浓度呈正比。人葡萄球菌的生长情况也同样受到抑制(P<0.01),但不同浓度注射液之间的抑制程度并无统计学差异。②17例患者中美兰组织培养的阳性率为82.3%,而普通组织培养的阳性率为88.2%,两组比较无统计学差异(P=0.3173>0.05)。从两组中相对应的组织块培养结果来看,亚甲蓝对产酸克雷伯菌和除溶血葡萄球菌之外的凝固酶阴性葡萄球菌有不同程度的抑菌作用。3、依据MSIS诊断标准,62例患者中PJI36例,无菌性松动26例。超声裂解液培养的敏感性为83.3%(95%CI,66.5%～93%),特异性为 84.6%(95%CI,64.3%～94.9%),阳性预测值为 88.2%(95%CI,71.6%～96.2%),阴性预测值为 75.8%(95%CI,58.5%～90.9%)。敏感性较关节液培养和组织培养高,且明显高于假体周围组织培养(P<0.05),但特异性较关节液培养及组织培养低,且明显低于关节液培养(P<0.05)。结论:1、2%利多卡因注射液对临床中常见的PJI病原菌具有很强的抗菌作用。因此,在关节液取样前使用2%利多卡因注射液进行局部浸润麻醉可能是影响细菌培养结果的一个潜在因素。2、0.1%亚甲蓝溶液对临床中某些PJI的致病菌具有一定的抗菌作用。作为骨科医师熟悉而又易获得的一种生物染色剂,亚甲蓝可能有助于生物膜的识别和组织块标本的取样,但同时也可能会使某种细菌的检出受到影响。3、超声裂解可以提高关节假体周围感染病原学的检出率,具有良好的临床应用价值。