急性呼吸道感染(Acute Respiratory Infections,ARI)是急性感染性疾病及其死亡病例的主要原因,是全球范围内的公共卫生问题。ARI可由多种病原微生物引起,其中,病毒是引起ARI的主要病原体。因此,开展ARI病原检测和分离,对于ARI流行趋势的监控以及预防、控制都具有重要的现实意义。本研究以2013年4月-2014年3月期间盘锦地区ARI患者咽拭子样品作为实验材料,进行病毒病原检测,分析其构成,对新发传染病流行征兆、重大传染源、早期病例等进行预判,以避免突发公共卫生事件的发生。研究结果如下:1、采用核酸提取、荧光定量PCR方法,对ARI患者咽拭子样品856份进行流感病毒(H1N1、H3N2、IVB)、合胞病毒(RSV)、副流感病毒(PIV1、PIV2、PIV3)、腺病毒(AdV)、偏肺病毒(MPV)、鼻病毒(HRV)检测,表明:(1)流感病毒、副流感病毒、鼻病毒和腺病毒是本地区引起ARI的主要病毒病原体,其阳性样品检出率分别为72.38%、5.71%、6.67%和10.48%;(2)在流感病毒阳性样品中,检出H1N1型67株、H3N2型9株,分别占阳性样品检出率的88.16%和11.84%,但未检出乙型流感病毒流感病毒;2、在2013-2014年,盘锦地区流感病毒的流行存在以下规律:冬季为高发期,夏季最低;发病年龄主要集中在5-14岁年龄组,而25-59岁组最低;以散发病例为主,未见流感爆发疫情,其中,新甲型H1为优势流行株,H3N2亚型少量出现。3、通过对盘锦地区流感病毒的MDCK细胞病毒分离和鸡胚病毒分离比较,发现流感病毒对鸡胚的敏感性仍然弱于MDCK细胞分离,但是在流感病毒疫苗生产中不能直接使用MDCK细胞分离病毒,因此需要将一次MDCK细胞分离和鸡胚分离要时进行,由此分离出的毒株可送国家流感中心用于试剂的制备和疫苗生产。综上所述,通过对盘锦地区2013年4月-2014年3月期间呼吸道感染病毒病原进行采样,利用分子生物学检测方法对病原微生物进行检测及分离,初步掌握本地区呼吸道感染病例样本中主要病毒种类及发病规律,并建立了MDCK细胞分离和鸡胚分离合并使用的流感病毒分离方法。本文研究结果为临床上医师用药、疫苗研制、突发公共卫生事件预警、指挥决策和现场处理提供一定科学依据。