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竹红菌甲素(Hypocrellin A,HA)是一种苝醌类光敏化合物,为药用真菌竹红菌(Hypocrella bambusea)与竹黄菌(Shiraia bambusicola)的次生代谢产物。目前HA主要在医学上作为光敏药物进行开发与利用,而作为光活化农药的研究才刚刚起步。本文采用菌丝生长速率法测定了HA对番茄灰霉的抑菌率;根据活性氧淬灭原理测定了HA光活化抑制番茄灰霉过程中的光反应类型;应用1O2捕捉原理、芬顿试剂法和核黄素光化学反应,分析了1O2、.OH与O2.-三种活性氧的产率与其对番茄灰霉抑菌率的相关性。结果如下:1.光照强度越大,HA浓度越高,HA对番茄灰霉的抑菌率越大,与不含HA的对照组差异均为显著。当光照强度为12000Lx时,40 mg.L-1的HA抑菌率可达到65.15%,光照对HA发挥作用具有重要影响。2.加入甘露醇、抗坏血酸、组氨酸3种淬灭剂并进行光照后,HA对番茄灰霉的抑菌率与对照组相比,均极显著减少,表明HA的抑菌活性是由光动力作用产生的活性氧自由基引起的。添加组氨酸后HA抑菌率与对照组差异最显著。可见HA抑制番茄灰霉是Type I和Type II两种光反应类型共同作用的结果,但以Type II为主。3.HA对番茄灰霉的抑菌率随1O2产率增加而提高。1O2产率和其对番茄灰霉抑菌率之间呈显著线性正相关(P<0.05),回归方程为Y=0.703X+0.117,R2=0.986。表明1O2在HA抑制番茄灰霉病菌中作用极显著,为关键抑菌因子。4..OH对番茄灰霉的抑菌率随芬顿试剂浓度增加而提高。.OH产率和其对番茄灰霉抑菌率之间呈显著线性正相关(P<0.05),回归方程为Y=0.0022X+0.0548,R2=0.9101。表明.OH在HA抑制番茄灰霉病菌中作用极显著,为关键抑菌因子。5.O2.-对番茄灰霉的抑菌率随核黄素浓度增加而提高。O2.-产率和其对番茄灰霉抑菌之间呈显著线性正相关(P<0.05),回归方程为Y=0.77X+0.045,R2=0.934。表明O2.-在HA抑制番茄灰霉病菌中作用极显著,为关键抑菌因子。6.逐步回归分析得到最优模型方程为Y=0.0559+0.8145X1+0.002X2+0.7384X3(X1为1O2产率,X2为.OH产率,X3为O2.-产率),R2=0.9619。可见1O2的偏相关系数最大,1O2为HA抑制番茄灰霉作用过程中的最关键抑菌因子,其次是O2.-,.OH的作用排在第三。本研究首次找到了竹红菌甲素对番茄灰霉的关键抑菌因子,可为HA开发为绿色高效的生物农药提供理论依据。