坏鳃指环虫人工感染系统的建立和杀虫药物的筛选

来源 :中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiexieni777
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指环虫(Dactylogyrus)是我国淡水鱼类的重要寄生虫病原之一。为了有效防治指环虫病,本论文研究了温度(4~35℃)对坏鳃指环虫(D.vastator)产卵和孵化的影响,并用纤毛幼虫感染健康金鱼,获得单一感染坏鳃指环虫的宿主;以人工感染系统为基础,研究了离体和在体条件下4种常用杀虫药物和中草药狼毒大戟(Euphorbia fischeriana)的不同提取物对坏鳃指环虫成虫虫卵的杀灭效果,以及敌百虫、吡喹酮、甲苯咪唑、40%辛硫磷和狼毒大戟乙酸乙酯提取物对金鱼(Carassius auratus)的毒性实验。本研究的主要结果如下:  1、在离体条件下,在4~35℃温度范围内,坏鳃指环虫的平均产卵量随着温度的升高而增加,在4、10、20、30和35℃条件下,其平均产卵量分别为0.25、5.9、9.1、9.2和13.4枚/虫,绝大多数虫卵是在离体后的前5h内产出;然而,在体条件下虫体的产卵是连续且稳定的,在20℃条件下平均产卵量为6.45枚/虫/天。虫卵的孵化时间和孵化持续的时间随着温度的升高而减少,在10、20、30和35℃条件下,孵化时间和孵化持续时间分别为19d、3d、2d、36h和24 d、5d、5d、3d,而最高的孵化率(65.5%)却出现30℃。20℃条件下,纤毛幼虫在感染7天后90%的虫体都已成熟,因此,在此温度条件下坏鳃指环虫由虫卵发育到成虫大约需要8~10天。在感染实验中,金鱼的感染率为100%,纤毛幼虫的感染成功率为25%。  2、虫卵在4℃中不孵化;当将虫卵置于4℃下培养2周及以上然后转移至20℃条件下培养时,虫卵的孵化率显著降低;如果先将虫卵在20℃条件下孵育12或24 h,然后转移至4℃下孵育时,与在20℃时相比,虫卵的孵化率没有显著性变化。  3、在离体条件下,敌百虫(0.5,1,1.5 mg/L),吡喹酮(10,20 mg/L),40%辛硫磷(0.1,0.2,0.4 mg/L),甲苯咪唑(0.02,0.04 mg/L)和狼毒大戟乙酸乙酯提取物(10,20 mg/L)均可以有效的杀灭坏鳃指环虫成虫,狼毒大戟的其他提取物(石油醚、正丁醇和水)则没有显著的杀灭效果。在体条件下,只有敌百虫、吡喹酮和狼毒大戟乙酸乙酯提取物可以显著降低虫体的数量,当三种药物的浓度分别为2.5、20和14 mg/L时,最高杀虫率分别为87.3%,80.3%和80.1%;甲苯咪唑的杀虫效果最差,最高杀虫率为46.9%(0.03 mg/L),显著低于敌百虫、吡喹酮和狼毒大戟乙酸乙酯提取物的杀虫率。40%辛硫磷具有中等程度的杀虫效果,最高杀虫率为69.3%(1.5 mg/L)。同时还发现,在甲苯咪唑、敌百虫和狼毒大戟乙酸乙酯提取物的测试浓度范围内,坏鳃指环虫虫卵的孵化率并没有显著降低,虫卵的胚胎发育过程也跟对照组类似;吡喹酮(10 mg/L、20 mg/L)和辛硫磷(0.4 mg/L)可以显著降低虫卵的孵化率,并延迟虫卵的发育。  4、甲苯咪唑、40%辛硫磷、敌百虫、吡喹酮和狼毒大戟乙酸乙酯提取物的96 h半致死浓度(LC50)分别为0.29,5.49,27.55,29.22和13.65 mg/L,故该5种药物的安全浓度(SC)分别为0.029,0.549,2.755,2.922和1.365 mg/L。
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