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目的:⑴建立人胰腺癌裸鼠移植瘤模型。⑵探讨人端粒酶逆转录酶(Human Telomerase Reverse Transcriptase,hTERT)启动子驱动的重组腺病毒介导单纯疱疹病毒胸腺嘧啶激酶(herpes simplex virus-thymidine kinase, HSV-TK)基因(Ad- HSV-TK)结合丙氧鸟苷(gancyclovir, GCV)联合放疗对人胰腺癌的治疗作用。方法:用瘤块移植的方法建立人胰腺癌细胞株patu 8988裸鼠皮下移植瘤模型,采用hTERT启动子驱动的Ad-HSV/TK经尾静脉注射荷瘤裸鼠后,腹腔注射GCV治疗,并分别予高能x线共20GY,观察对正常组织器官的影响,观察肿瘤体积、相对肿瘤体积、瘤重、相对肿瘤增殖率以及肿瘤体积生长变化的时间曲线,评价Ad-hTERT-TK/GCV联合放疗的抗肿瘤活性;联合肿瘤的常规病理检查、免疫组化染色法核增殖抗原(PCNA)检测、肿瘤微血管免疫组化染色及微血管密度MVD检测、肿瘤组织细胞凋亡的检测(TUNEL法)、流式细胞学方法细胞凋亡测定等检测方法进一步评价Ad-hTERT-TK/GCV联合放疗的抗肿瘤活性。结果:在一定浓度的作用底物GCV存在条件下,Ad-hTERT-HSV-TK联合放射治疗抑瘤率达到86.56%;Ad-hTERT-TK/GCV和放疗单独应用,抑瘤率分别是67.21%、59.26%;病理检查及Ad-hTERT-HSV-TK/GCV+放疗组肿瘤细胞呈稀疏分散排列,有大量片状坏死,肿瘤血管明显减少,组织结构紊乱,多为纤维组织所代替,部分胞浆空泡性变,胞浆淡染,染色质疏松,部分肿瘤细胞核固缩,呈退化表现,其它两治疗组镜下表现无Ad-hTERT-HSV-TK/GCV+放疗组明显,对照组肿瘤HE染色见肿瘤为大量瘤细胞组成,排列紧密,间质极少,细胞群边缘不光整,肿瘤血管网络丰富,肿瘤细胞边界不清,细胞形态和细胞核呈多行性,细胞核大深染,核分裂像多见; Ad-hTERT-HSV-TK/GCV+放疗、Ad-hTERT-HSV-TK/GCV及单纯放疗治疗后,各治疗组裸鼠的心、肺、肝、脑、肾、脾等组织形态学观察,与对照组裸鼠的组织形态学上无显著区别;在Ad-hTERT-HSV-TK/GCV+放疗组的肿瘤组织中,肿瘤细胞的PCNA增殖指数明目的:⑴建立人胰腺癌裸鼠移植瘤模型。⑵探讨人端粒酶逆转录酶(Human Telomerase Reverse Transcriptase,hTERT)启动子驱动的重组腺病毒介导单纯疱疹病毒胸腺嘧啶激酶(herpes simplex virus-thymidine kinase, HSV-TK)基因(Ad- HSV-TK)结合丙氧鸟苷(gancyclovir, GCV)联合放疗对人胰腺癌的治疗作用。方法:用瘤块移植的方法建立人胰腺癌细胞株patu 8988裸鼠皮下移植瘤模型,采用hTERT启动子驱动的Ad-HSV/TK经尾静脉注射荷瘤裸鼠后,腹腔注射GCV治疗,并分别予高能x线共20GY,观察对正常组织器官的影响,观察肿瘤体积、相对肿瘤体积、瘤重、相对肿瘤增殖率以及肿瘤体积生长变化的时间曲线,评价Ad-hTERT-TK/GCV联合放疗的抗肿瘤活性;联合肿瘤的常规病理检查、免疫组化染色法核增殖抗原(PCNA)检测、肿瘤微血管免疫组化染色及微血管密度MVD检测、肿瘤组织细胞凋亡的检测(TUNEL法)、流式细胞学方法细胞凋亡测定等检测方法进一步评价Ad-hTERT-TK/GCV联合放疗的抗肿瘤活性。结果:在一定浓度的作用底物GCV存在条件下,Ad-hTERT-HSV-TK联合放射治疗抑瘤率达到86.56%;Ad-hTERT-TK/GCV和放疗单独应用,抑瘤率分别是67.21%、59.26%;病理检查及Ad-hTERT-HSV-TK/GCV+放疗组肿瘤细胞呈稀疏分散排列,有大量片状坏死,肿瘤血管明显减少,组织结构紊乱,多为纤维组织所代替,部分胞浆空泡性变,胞浆淡染,染色质疏松,部分肿瘤细胞核固缩,呈退化表现,其它两治疗组镜下表现无Ad-hTERT-HSV-TK/GCV+放疗组明显,对照组肿瘤HE染色见肿瘤为大量瘤细胞组成,排列紧密,间质极少,细胞群边缘不光整,肿瘤血管网络丰富,肿瘤细胞边界不清,细胞形态和细胞核呈多行性,细胞核大深染,核分裂像多见; Ad-hTERT-HSV-TK/GCV+放疗、Ad-hTERT-HSV-TK/GCV及单纯放疗治疗后,各治疗组裸鼠的心、肺、肝、脑、肾、脾等组织形态学观察,与对照组裸鼠的组织形态学上无显著区别;在Ad-hTERT-HSV-TK/GCV+放疗组的肿瘤组织中,肿瘤细胞的PCNA增殖指数明