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目的与意义变应性鼻炎(Allergic Rhinitis,以下简称AR)的发病机制复杂,其发生与许多细胞因子有关,以血清中IgE、白介素4(IL-4)、IL-5水平显著升高为特点。发作时细胞因子的产生及炎性介质(mediator)的参与均与机体异常的免疫调节有关,即存在T辅助细胞亚群功能失调,通过释放细胞因子,促进IgE的合成与分泌,并增加炎性细胞的浸润和活化。细胞因子网络失调可能是变应性疾病发生的分子生物学基础之一。T细胞免疫球蛋白域黏蛋白域蛋白(Tcell immunoglobulin domain and mucin domain protein,Tim)基因家族是2001年发现的新基因家族,Tim蛋白是Tim基因编码的一类具有共同基序的跨膜糖蛋白,Tim-1、Tim-2和Tim-3蛋白均表达在T细胞表面,其中Tim-1表达于Th2细胞,Th1细胞不表达,而Tim-3则高表达于Th1细胞而不表达于Th2细胞[1]。国外有研究发现Tim-3基因多态性与变应性疾病的易感性有关[2-4]。为了解Tim-3基因多态性与尘螨变应性鼻炎的关系,本文利用聚合酶链式反应(PCR)及扩增阻碍突变系统(ARMS)技术检测对尘螨变应性鼻炎和对照组的Tim-3启动子区基因多态性。了解汉族人群中Tim-3启动子区基因多态性在尘螨变应性鼻炎人群中的分布情况,研究基因型与表型之间的内在联系,探讨尘螨变应性鼻炎发生的分子遗传学机制及遗传因素对尘螨变应性鼻炎的作用机理,为进一步更好防治变应性鼻炎提供遗传学线索。材料与方法1.研究对象:为广东地区广东籍自然人群,饮食结构相似,各研究对象之间无血缘关系。实验组为临床确诊的AR患者88例,并根据统一标准进行分组、分型;对照组共102例,为性别、年龄与AR组匹配的门诊体检正常人。2.人外周血白细胞DNA的提取:静脉血2ml,EDTA抗凝,采用美国Gentra公司的DNA抽提试剂盒,抽提基因组DNA。3.常规空腹血样送广州医学院第二附属医院变态反应科在UniCAP100上测定TIgE含量。4.参照基因库(GenBank)设计引物,Tim-3基因-574G>T分型采用扩增阻碍突变系统(ARMS)法,Tim-3基因-1541C>T,-882T>C分型用PCR-RFLP法,分别扩增Tim-3基因-1541C>T,-574G>T、-882T>C目标基因片断,用内切酶酶切,非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳观察判断相应的基因型。5.统计学分析:用SPSS11.5统计软件进行分析处理。结果:1.-1541C>T基因多态性与AR的关系-1541C>T基因基因多态性与AR存在相关性,AR组中C/T基因型频率低于对照组;AR组与对照组之间等位基因频率存在显著性差异(χ2=4.30,p<0.05),AR组的C等位基因频率显著高于对照组(χ2=3.93,p<0.05)。2.-882T>C基因多态性与AR的关系AR组与对照组对比,各基因型频率均无显著性差异(χ2=0.016,p>0.05)。AR组与对照组之间等位基因频率不存在显著性差异(χ2=0.034,p>0.05)。3.-574G>T基因多态性与AR的关系运用χ2检验、连续性校正等方法分析AR组与对照组的-574G>T基因多态性分布情况,结果表明-574G>T的各基因型频率(χ2=0.68,p>0.05)和等位基因频率在AR组和对照组之间的分布无显著性差异(χ2=0.68,p>0.05)。4.Tim-3-1541C>T,-882T>C,-574G>T复合突变与AR的关系Tim-3-1541C>T,-882T>C,-574G>T的各复合基因型在AR组和对照组之间的分布无显著性差异(χ2=1.78 p>0.05)。5.TIgE与AR的关系AR组中TIgE含量与对照组的TIgE含量有显著性差异(t=4.32,p<0.001),AR组中TIgE含量要明显高于对照组。结论:1.-1541C>T基因基因多态性与AR存在相关性。AR组中C/T基因型频率低于对照组;AR组与对照组之间等位基因频率存在显著性差异,AR组的C等位基因频率显著高于对照组,C等位基因可能是AR的易感基因。2.-882T>C基因基因多态性与AR无明显的相关性。AR组与对照组之间等位基因频率不存在显著差异。3.-574G>T基因基因多态性与AR无明显的相关性。AR组与对照组之间等位基因频率不存在显著差异。4.-1541C>T,-882T>C,-574G>T的各复合基因型在变应性鼻炎组和对照组之间的分布无显著性差异。