酶法提取酸枣仁皂苷研究

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酸枣仁是鼠李科植物酸枣Ziziphus jujuba Mill.var.spinosa(Bunge)Hu ex H.F.Chou的成熟种子,《神农本草经》列为上品,其味酸性平、归肝、胆、心经,具有补肝、宁心、敛汗和生津的功效,是一较为常用的镇静催眠中药。主要用于治疗虚烦不眠,惊悸多梦,体虚多汗,津伤口渴等症。药理学实验证明,酸枣仁中的皂苷对各种病因引起的失眠症和神经衰弱症均有良好的效果,几乎无毒副作用,与西药相比,是安全性较好的天然镇静催眠药。为提高酸枣仁提取物中皂苷这一镇静催眠药用有效成分含量,本文对照研究了传统水提、醇提、半仿生提取酸枣仁皂苷工艺,重点研究了酶法提取酸枣仁皂苷工艺,酶法提高了酸枣仁皂苷的提取率。优化出酶法提取酸枣仁皂苷的最佳工艺条件。研究了超滤和大孔吸附树脂纯化提取物的工艺。以酸枣仁皂苷A作对照,对酶法制备的酸枣仁提取物进行了薄层扫描验证,酶法制备的提取物中酸枣仁皂苷成分与标准品一致。并研究了酶法制备的酸枣仁提取物的镇静催眠药理作用。结果:1、确定酶法为酸枣仁皂苷的最佳提取工艺,优化出酶法提取酸枣仁皂苷的最佳工艺条件:酶解温度为40℃,酶解液初始pH值为4.5,纤维素酶与果胶酶用量均为30U/g生药,酶解时间为5h,提取。2、经薄层色谱扫描验证,酶法制备的提取物中酸枣仁皂苷成分与标准品一致。3、采用超滤技术与大孔吸附树脂技术分离纯化酸枣仁提取物,酶法提取物酸枣仁皂苷纯度为48.96%。4、对酶法提取的酸枣仁提取物进行了镇静催眠作用的药理研究,结果表明酶法酸枣仁皂苷提取物对于小鼠睡眠有较好的调节作用,可增加阈下戊巴比妥钠小鼠的入睡率,显著缩短小鼠睡眠潜伏期;延长戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠时间。5、建立了分光光度法测定酸枣仁皂苷含量的方法,通过高效液相色谱法研究了不同工艺酸枣仁皂苷提取物的图谱,为建立酸枣仁皂苷提取物的质量标准打下基础。结论:酶法比水提、醇提工艺提高了酸枣仁皂苷提取率。酶法提取酸枣仁皂苷是将酶生物技术应用于提取酸枣仁皂苷镇静催眠药效成分的有效方法。
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