【摘 要】
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第一部分钙调节相关蛋白在C型Niemann-Pick病小鼠Purkinje细胞的表达目的探讨钙调节相关蛋白在C型Niemann-Pick病小鼠Purkinje细胞的表达方法采用免疫组织化学染色计数小脑Pu
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第一部分钙调节相关蛋白在C型Niemann-Pick病小鼠Purkinje细胞的表达目的探讨钙调节相关蛋白在C型Niemann-Pick病小鼠Purkinje细胞的表达方法采用免疫组织化学染色计数小脑Purkinje细胞的数量,联合Westen Blot技术检测三种Ca2+调节相关蛋白Calbindin-D28k、IP3R1、SERCA2b在4周、6周和8周龄的NPC小鼠小脑部的表达,以同周龄WT(野生型)小鼠(n=6)作为对照组。结果在NPC小鼠小脑部Purkinje细胞存在脱失,数量明显减少并异位至颗粒层。Calbindin-D28k和IP3R1在6周、8周时表达较野生型显著下降,在4周时无明显减少,SERCA2b在8周时表达较野生型显著下降。结论在Purkinje细胞的变性过程中伴随了三种钙调蛋白表达的下降,可能导致了钙失衡,参与了神经元的变性。第二部分慢病毒介导的TNF-αSiRNA对2w NPC小鼠行为学的影响目的寻求TNF-αSiRNA对C型尼曼-皮克病(NPC)小鼠最佳的干预时间。方法对2周龄NPC小鼠侧脑室注射携带TNF-α-siRNA的慢病毒,动态测量小鼠体重,并通过衣架悬挂试验及足印试验评估小鼠第4到8周的运动能力,以注射lentivirus-control(空慢病毒载体)组和未干预的的NPC小鼠作为阴性对照。结果TNF-α-siRNA组小鼠体重减轻明显延缓;衣架悬挂试验显示TNF-α-siRNA组小鼠运动障碍明显改善;足印试验显示TNF-α-siRNA组步距也明显增加。结论用TNF-α-siRNA早期干预NPC小鼠能更好的改善其行为学
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