背景材料：常规体外授精-胚胎移植（In-vitro fertilization and embryotransfer，简称IVF-ET）的胚胎在体外培养2～3天，于4～8细胞期移植回宫腔，胚胎种植率约10～30％。然而胚胎体外培养至囊胚期移植更符合生理需要，而且可以减少移植胚胎数，有利于选择能逾越4～8细胞期发育阻滞的有生命力的胚胎，并能帮助显微操作后修复，是提高种植率、避免减胎的方法之一。囊胚期胚胎培养有共同培养（co-culture）和序贯培养（sequential culture）两种技术。前者需制备辅助细胞，步骤繁琐，而且有交叉感染的危险，序贯培养相对简单可行。目的：本课题将第3天移植后的剩余胚胎移入预设培养液（IVC-Three Blastocyst Medium、BlastocystMedium或HTF）中进行后续培养，观察囊胚形成情况，分析第3天胚胎的细胞数和质量分级与囊胚形成之间的关系，比较三种培养液的囊胚形成率，为临床实现5天胚胎移植提供理论依据。材料和方法：本课题选取1999年11月～2001年4月间在我院志愿接受IVF-ET或单精子胞浆内注射-胚胎移植（Intracytoplasmic sperm injection and embryo transfer,简称ICSI-ET）的18例不孕患者，共获移植后剩余胚胎54个。IVF-ET过程按临床常规进行，移植前按美国纽约大学1＊F中心标准行胚胎质量分级，记录胚胎细胞数和级别。剩余胚胎移入含10％合成血清代用品（SSS）的预设培养液中，每天观察胚胎生长发育情况，直至退化或受精后第7天，第 6天未退化者更换新鲜培养液。结果：这 18例患者平均年龄 29．78士3．34岁，平均取卵10，33士5．78个，平均受精数7．56士3．76个，平均移植胚胎3．39土0．50个。54个胚胎中16个形成囊胚，总囊胚形成率29石％；12个囊胚充分扩张，透明带变薄；3个囊胚出现孵化现象。18例之中6例获临床妊娠，临床妊娠率n．ac，o，其中2例单胎，z例双胎，z例三胎；共移植胚胎 61个，种植 12个，胚胎种植率 19．7％。讨论：分析第 3天胚胎与囊胚形成之间的关系，发现囊胚形成率随第3天胚胎细胞数的增加而增加，两者呈显著正相关（，0，99，P＜0刀01），细胞数在8个以上者囊胚形成率可达50％。同时，胚胎质量级别l～2．5级的卵裂球比3～4级者具有更高的囊胚形成率门4，90比9．lo人 虽然检验后无显著差异（X乙l．69，P＞0刀5）。在选用的三种后续培养液中，IVC－Three Medium具有最高的囊胚形成率，与其他两种培养液比较有显著差异（扩书．gZ，P吻刀25），而且经胚胎细胞数标准化后的IVC－Thlee Medium囊胚形成率达56．1％，与国外报道数字相近。本文还分析了剩余胚胎囊胚形成与否与临床妊娠的关系，10例形成囊胚者获4例妊娠，而8例无囊胚形成者2例妊娠，经检验无显著差别，但结合其他报道认为有一定临床意义。目前国内常规IVF均移植3～4个胚胎，甚至5个，多胎妊娠带来很多并发症。移植l—2个囊胚期胚胎是避兔多胎的有效方法。由于观察的胚胎数量不多，囊胚的质量判定尚缺乏经验，有待于进一步进行实验室研究。囊胚期胚胎培养和移植尚存在一些实际困难，如培养后移植取消率增加，囊胚的质量评定标准较混乱等。结论：1．移植剩余的胚胎进行后续培养，可以达到一定的囊胚数量，证明在一定的实验室条件下，应用序贯培养的囊胚期胚胎培养技 3术是可行的。2，受精后第3天的胚胎细胞数与囊胚形成率呈显著正相关；不同胚胎质量分级的囊胚形成率无显著差异，但具体数字差别较大，也有一定指导意义。说明如果第3天形态良好的8细胞胚胎在3个以上者可以继续培养至第5天，以便更准确的选择有生命力的胚胎。3．IVC－ThxeeMedium比 Blastocyst Medium和 HTF培养液具有更高的囊胚形成率，可供临床选用。4．移植2个以下囊胚期胚胎是避免多胎妊娠、减少并发症的有效方法。