肾脏是人体极其重要的排泄与内分泌器官,正常的肾脏功能保证了机体内环境的稳定和新陈代谢的正常功能,肾脏的损坏严重影响人体的存活。近些年来进行肾脏移植手术是治疗慢性肾功能不全发展至终末期相对有效理想的治疗方法。然而肾移植术后患者有时会发生肾移植排斥现象,这将严重影响肾脏在受体患者中的存活率,进行移植肾术后患者动态疗效观察必不可少,这将对移植后肾脏病情变化起到及时监控作用。所以找到一种能进行术后指标动态追踪观察的有效标志物,将会对肾移植产生深远影响。近年来,大量研究表明,循环miRNAs可作为疾病诊断的有效标记物,因为正常人和患者miRNAs存在明显的差异表达。所谓循环miRNAs就是机体内稳定状态下血清或者血浆等内源性的miRNAs,它可在疾病中作为一种无创伤、方便且能迅速诊断的标志物而存在。实时荧光定量PCR技术(real-time quantitative PCR)在医学和生物学领域被广泛应用,它可作为辅助临床诊断的一种可靠高灵敏度实验性仪器,同时还具有定量准确、自动化和重复性好等优点。目的：应用qRT-PCR技术进行扩增检测肾移植前后血清miR-181a、 miR-483-5p、miR-557表达量,找出与正常对照组间存在的差异表达。对同一病人患病不同时期miRNA的变化趋势进行比较,以评价血清miRNA在肾移植术后患者动态过程中的价值。寻找监测肾移植术后患者动态变化的生物标记物,为临床患者术后观察提供依据,进一步研究肾移植排斥打下良好基础。使用Targetscan软件对miRNAs进行靶基因的预测,为研究miRNAs的功能以及作用机制做下铺垫。方法：收集2009年-2010年桂林市第181医院肾脏科15例手术患者血清标本,包括肾移植术前1天以及术后1、3、7天患者血清和体检中心16例正常对照组血清。进行总RNA提取,利用核酸蛋白分析仪(Beckman Coulter, USA)测定RNA浓度,根据RNA在OD260nm/OD280nm≥1.8鉴定RNA纯度及完整性。构建：miR-181a、miR-483-5p、miR-557的qRT-PCR反应体系。由GenBank查找基因序列,使用软件Primer-Express2.0进行引物与探针的设计。利用定量RT-PCR技术进行病人不同组不同时期不同miRNA差异表达的动态过程研究和观察,对比正常组与术前组、术后1天组、术后3天组、术后7天组,术前组与术后1、3、7天组,术后1天组与术后3、7天组以及术后3天组与术后7天组进行表达量的分析。所有数据均以SPSS13.0统计分析软件完成,实验所得数据以x±s表示,通过q检验分析,以P<0.05为有统计学差异。结果：实验结果显示肾移植前患者血清中3种miRNAs表达量均高于正常对照组miRNAs表达量,miR-181a、miR-483-5p、miR-557分别高出正常值3.3727倍、1.3213倍和1.2192倍。经过统计学分析1niRNA-181a在肾移植术后第7天有统计学意义(P<0.05),但是术后表达量存在不稳定趋势。：miR-483-5p和miR-557无统计学意义(P>0.05)。miRNA-557在移植术后表达量水平明显下降且术后第7天明显低于术后1天的表达水平,接近正常对照组水平。miRNA-483-4p表达水平也有下降趋势,但是在术后第3天有升高之后趋于正常对照组水平。使用软件Targetscan对3种1miRNAs进行靶基因预测,分别为人类diphosphoinositol pentakisphosphate激酶2位于染色体5p21.1上、丝/精氨酸剪接因子4位于染色体1p35.3上、以及BTB和CNC同源性1,碱性亮氨酸拉链转录因子。结论：术前肾移植患者血清中IniR-181a、miR-483-5p、miR-557与正常对照组血清miRNAs存在明显的表达差异,能作为肾病生物标志物存在。术后,miR-483-5p与miR-557表达量与术前组比明显下降。miR-557在肾移植术后患者血清中存在较稳定的趋势下降,有望成为肾移植术后患者疗效观察的可行性标志物。miR-181a、miR-483-5p术后表达量存在波动性变化,可能与术后药物治疗和肾移植功能延迟恢复、移植物对宿主的排斥和手术创伤等有关。通过对miRNAs靶基因预测找出与疾病有关的基因位点,为更好的研究这3种miRNAs的功能打下良好基础。