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本试验的目的是从酸奶中分离出发酵性能良好的保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌,并通过冷冻干燥手段,制备成含菌数高(10<10>cfu/g)、发酵活性强、接种量比普通发酵剂低100倍以上的浓缩乳酸菌混菌发酵剂,用该发酵剂发酵的酸奶品质良好。本试验首先用选择性培养基酸化MRS和M17分别筛选出保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌,并通过菌种的凝乳试验,菌种比例搭配试验,传代稳定性试验,最终得到保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌各一株。通过对以上两种混菌有增殖作用的培养物质进行选择,得到培养两种混菌的培养基配方为:7.5%豆芽汁+2.5%啤酒+10%脱脂乳+2%葡萄糖+0.5%酵母膏+8.3%番茄汁+1%蛋白胨+0.5%乳糖+0.006mol/LCa<2+>+0.1%吐温80。用此配方在发酵罐中培养保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混菌,接种量为1%,其中保加利亚乳杆菌与嗜热链球菌的比例为1:1,温度为30℃,保持pH稳定在6.0,碱液为15%Na2C03,培养12h,菌数可达到4.5×10<9>cfu/ml。菌液再经4℃、7000rpm离心30min,离心获得率可达到100%。将收集到的沉淀与10%脱脂乳、5%谷氨酸钠、10%蔗糖组成的抗冻保护剂溶液等体积混合,制备成浓缩乳酸菌悬浮液,然后将其在压力为0.5Pa,温度-50℃左右,进行冷冻干燥处理24h后,保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌混菌冷冻干燥存活率可达到95.00%,最终成品粉末中菌体数目可达1.32×10<11>cfu/g。将冷冻干燥乳酸菌浓缩发酵剂成品加入10%脱脂乳的复水介质中,在20℃浸润30min,然后按普通发酵接种量的1/1000进行发酵酸奶试验,在42℃,发酵3.5h的条件下,酸奶凝固状态良好,风味和组织状态与普通发酵剂制作的酸奶没有差别,证明此乳酸菌浓缩发酵剂已达到应用要求。在4℃储藏三个月,细胞存活率可达82.6%,储藏效果良好。