【摘 要】
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由世界卫生组织命名为COVID-19的新型冠状病毒目前仍呈现全球蔓延泛滥的态势,全球人类的生命安全已经受到了严重的威胁。结合全球新冠病毒大流行的情况,我国现实行“外防输入、内防反弹”的防控策略。对外预防输入的重点在于进境口岸海关,因此应及时对入境高热人员或疑似人员进行现场核酸检测,并进行隔离治疗。而对内预防反弹的重点则是针对机场、车站等公共场所以及发热门诊的高热人群和疑似人群展开现场核酸检测,并进
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由世界卫生组织命名为COVID-19的新型冠状病毒目前仍呈现全球蔓延泛滥的态势,全球人类的生命安全已经受到了严重的威胁。结合全球新冠病毒大流行的情况,我国现实行“外防输入、内防反弹”的防控策略。对外预防输入的重点在于进境口岸海关,因此应及时对入境高热人员或疑似人员进行现场核酸检测,并进行隔离治疗。而对内预防反弹的重点则是针对机场、车站等公共场所以及发热门诊的高热人群和疑似人群展开现场核酸检测,并进行及时的隔离治疗。所以可用于现场核酸快速检测试剂对现阶段实行“外防输入、内防反弹”的防控策略意义重大。本研究以环介导等温扩增技术(LAMP)为基础,以金磁微粒为核心载体,创建了一种“LAMP-金磁微粒层析法”新型冠状病毒核酸检测技术。该平台通过核酸免提取一步扩增结合金磁微粒层析系统可进行目视化判读或基于金磁微粒磁信号识别两种方式完成结果的分析,整个检测过程可在30分钟内完成。研究首先针对新冠病毒的两个检测位点(N,ORF),结合基于金磁微粒的层析系统和环介导等温扩增技术对新型冠状病毒的单重扩增体系的引物进行了筛选及优化;其次将内标基因Rnase P引入环介导等温扩增体系进行双重扩增,作为内参照系统对采样及扩增过程实现质量内控监测,实现了双重“LAMP-金磁微粒层析法”核酸检测系统的构建。最后通过假病毒标准品针对单重和双重扩增体系均进行了性能评估,该检测技术通过磁信号识别,灵敏度可达50 copies/m L,且具有良好的特异性。本研究以金磁微粒为核心载体,结合环介导等温扩增技术(LAMP)建立一种双重“LAMP-金磁微粒层析法”新型冠状病毒核酸检测技术。该检测技术以Rnase P为内标,可通过核酸免提取一步扩增30分钟内完成检测,检测灵敏度可达50 copies/m L。该检测技术对海关,机场,车站等公共场所等不同级别医疗机构具有很好的应用前景。
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