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随着人类基因组研究计划的不断深入,越来越多的疾病中发现miRNAs的表达处于失调状态,这也包括全球发病率较高的乳腺癌。众多前期研究已经表明miRNA可以调控肿瘤抑癌基因或致癌基因,关于miRNAs作为乳腺癌的生物标志物的研究方兴未艾,甚至某些miRNAs已经应用于预后、诊断及疗效预测,miRNAs在调节乳腺癌细胞功能中具有关键作用,在增殖、侵袭、凋亡、转移和耐药能力等方面表现出巨大的研究潜力。此外,在肿瘤患者的体液中循环miRNAs可以用于乳腺癌患者的非侵入性检测。因此,深入研究miRNAs在乳腺癌组织中的调控作用具有重要的临床意义。研究目的:miRNAs被认为是重要的生物标记物,我们通过基因芯片技术发现乳腺癌组织中miR-22-5p-5p表达明显下调,ATP柠檬酸裂解酶(ATP citrate lyase,ACLY)在乳腺癌组织中表达明显上调,上调表达miR-22-5p-5p时ACLY的表达明显降低,并经过生物信息学靶基因预测软件分析推测miR-22-5p可能调控ACLY的表达。本课题研究目的为探究miR-22-5p的生物学功能,阐明调控下游靶基因ACLY的机制。研究方法:1、采用基因芯片技术对乳腺癌组织和周边非癌组织中的基因进行检测,筛选出表达具有显著性差异的基因,利用qRT-PCR技术验证其在乳腺癌组织和周边非癌组织中表达水平的差异。2、回顾性分析miR-22-5p表达水平与乳腺癌患者生存及临床参数之间的相关性,阐明miR-22-5p表达差异在乳腺癌中的临床意义。3、利用CCK-8、流式细胞术、免疫荧光检测细胞侵袭和迁移等实验技术,分析miR-22-5p的表达水平变化对乳腺癌细胞MCF-7细胞的增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响。4、利用荧光素酶基因报告系统研究miR-22-5p-5p对下游靶基因ACLY的调控机制。5、构建小鼠肿瘤模型,研究上调表达和下调表达mi R-22-5p对裸鼠成瘤的影响。研究结果:1、基因芯片技术分析发现mi R-22-5p在乳腺癌组织及周边非癌组织表达有差异,miR-22-5p在乳腺癌组织中表达明显减少。2、回顾性分析显示miR-22-5p的低表达与乳腺癌分子分型、TNM分级、淋巴结转移和远处转移的发生率高、预后差存在正相关。3、miR-22-5p的上调表达能够抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭,并可以诱导肿瘤细胞的凋亡,敲低表达结果相反。4、miR-22-5p的表达调控实验即荧光素酶基因报告系统实验及免疫印迹实验显示miR-22-5p基因过表达能够降低ACLY蛋白表达水平,敲低其表达的实验则得出相反的结果。5、miR-22-5p处于上调表达时能够通过抑制ACLY的表达来抑制肿瘤乳腺癌细胞生长、促进其凋亡。并且在动物模型中也证实了上调表达mi R-22-5p可以抑制裸鼠成瘤。结论:本研究表明miR-22-5p在乳腺癌组织中表达下调,并与乳腺癌的临床参数及预后相关,上调表达miR-22-5p能通过下调节表达ACLY蛋白来实现对乳腺癌细胞生物学功能的调控,表明miR-22-5p/ACLY有望作为乳腺癌的新的预后生物标志物和治疗靶点,具有重要的临床治疗和研究意义。