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七星瓢虫Coccinella septempunctata L.是一种优良的捕食性天敌昆虫,在蚜虫的生物防治中起到了重要作用。七星瓢虫以成虫形态进行滞育越冬或越夏,通过调控滞育,可以促进七星瓢虫大规模扩繁,延长商品货架期。保幼激素(Juvenile hormone,JH)是一种重要的滞育激素,可促进昆虫生殖系统发育和卵黄原蛋白合成,调控昆虫滞育。保幼激素酯酶(Juvenile hormone esterase,JHE)和保幼激素环氧水解酶(Juvenile hormone epoxide hydrolase,JHEH)是JH的关键降解酶,可以调控昆虫体内JH水平,进而调控昆虫滞育。前期研究中,获得了JHE基因(Csjhe)全长,由七星瓢虫转录组数据分析得知,保幼激素环氧水解酶和保幼激素酯酶的表达量在滞育与非滞育个体内差异表达。推测上述2种酶在调控七星瓢虫滞育中发挥重要作用,其在滞育中的功能及其调控机制等尚不明确。本研究以七星瓢虫为试验对象,首先,通过向七星瓢虫滴加外源保幼激素类似物(Juvenile hormone analogue,JHA),进而检测JH对七星瓢虫滞育的影响。其次,克隆了Csjheh基因全长,分析了Csjheh和Csjhe基因在七星瓢虫不同滞育阶段的表达模式,利用RNAi技术探究了JHEH和JHE在七星瓢虫滞育中的功能。主要研究结果如下:1.初羽化七星瓢虫成虫滴加外源JHA,与对照组相比,卵巢发育更加成熟,卵黄原蛋白含量显著增加,总脂含量持有稳定趋势,无明显的脂富集现象;在正常发育条件下成对饲养,滴加外源JHA处理组的雌性成虫产卵量增加,产卵前期显著缩短。2.基于七星瓢虫转录组数据,以滞育60天的七星瓢虫cDNA为模板,经RT-PCR、RACE技术克隆获得Csjheh基因全长,命名为Csjheh(GenBank登录号:MH932586),该基因cDNA全长2 077 bp,开放阅读框(ORF)1 380 bp,编码459个氨基酸,预测蛋白质分子量为51.39 kDa,理论等电点(pI)为8.79。疏水性分析结果显示该基因具有典型环氧水解酶的N末端疏水结构。氨基酸序列比对结果表明,CsJHEH与中欧山松大小蠹、赤拟谷盗、丽蝇蛹集金小蜂、内华达古白蚁的保幼激素环氧水解酶同源性达到64.24%。3.荧光定量qRT-PCR结果表明,CsJHEH和CsJHE在七星瓢虫滞育各个阶段、正常发育阶段和滞育解除阶段均有特异性表达,但在初羽化期和滞育中期表达量明显高于其他阶段。4.利用RNAi技术沉默目的基因CsJHEH,第7d时目的基因表达量显著低于对照组;干扰目的基因后,处理组卵黄原蛋白含量显著增加,总脂含量降低,产卵前期缩短,促进了成虫卵巢发育。