【摘 要】
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糖甜菜(Beta vulgaris L.)为二年生苋科植物,是我国重要的糖料作物。二年生甜菜的抽薹和开花由春化作用决定。在生产中,春化敏感的甜菜会受到环境的影响,出现早抽薹的现象,导致甜菜根中的含糖量显著降低。在育种和种子生产中,春化耐受甜菜所需育种周期长,不充足的春化还会影响种子产量与质量。因此,研究甜菜的春化作用机制的对甜菜产业具有重要意义。本研究以甜菜KWS9147为实验材料,利用RNA-s
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糖甜菜(Beta vulgaris L.)为二年生苋科植物,是我国重要的糖料作物。二年生甜菜的抽薹和开花由春化作用决定。在生产中,春化敏感的甜菜会受到环境的影响,出现早抽薹的现象,导致甜菜根中的含糖量显著降低。在育种和种子生产中,春化耐受甜菜所需育种周期长,不充足的春化还会影响种子产量与质量。因此,研究甜菜的春化作用机制的对甜菜产业具有重要意义。本研究以甜菜KWS9147为实验材料,利用RNA-seq和LC-MS/MS的方法比较分析了未春化(CK)、4℃春化16周(Vel)和春化后室温培育5天(Re)三个时期甜菜的转录和植物激素水平差异。基于不同时期甜菜内源激素变化及其激素合成和信号通路中相关基因的表达模式,探索春化作用对激素含量的影响及其与抽薹发生之间的关系。并通过对甜菜施加外源激素的方式来间接验证春化作用引起的激素变化与甜菜抽薹的关系。本研究的主要结果如下:(1)甜菜春化过程中,内源激素含量大多呈下降趋势。本次实验一共检测了88种植物内源激素,其中32种激素含量发生显著变化,大部分在Vel时期呈下降趋势,且在Re时期保持较低含量。令人值得关注的是赤霉素(Gibberellin,GA)、脱落酸(Abscisic acid,ABA)和茉莉酸(Jasmonic acid,JA)的含量在甜菜春化前后变化差异较大。GA19在Vel和Re时期的含量相较于CK时期上升1.66倍和2.02倍,GA53下调3.47倍和7.15倍。ABA的含量发生了显著的下调变化,整体下调34.29倍。JA在CK时期含量为30.76 ng/g FW,在Re时期含量为9.06 ng/g FW,整体发生显著下调,下调3.39倍。(2)转录组学分析表明甜菜春化过程中内源激素GA和ABA含量的变化与激素合成的相关基因表达变化有关。与ABA合成相关的基因BvCrtB、BvCrtZ、BvZEP、BvNCED、BvABA2和Bv CYP707A在甜菜春化过程中表达整体下调。其中,BvCrtZ和BvNCED的下调是ABA合成被抑制的关键原因。在GA合成通路中,BvGA20OX在春化后表达量显著下调。结合GA19、GA53和GA20含量变化,推测BvGA20OX的下调可能是限制GA合成的关键。在GA的信号通路中,大部分BvGID1和Bv DELLA在春化后分别呈上调和下调表达,暗示春化作用在转录水平有助于GA信号通路激活。(3)通过对甜菜施加外源激素验证了ABA与GA之间的拮抗作用会对甜菜抽薹产生一定影响。施加ABA与GA3激素组合时,甜菜的抽薹率并未有明显下降,但抽薹开始的时间和抽薹的长度均显著低于另外两组。相较于单独施加GA3的甜菜幼苗,施加钨酸钠与GA3激素组合的甜菜幼苗抽薹所需时间较短,但不显著(P<0.05)。综上得出,在甜菜春化过程中虽然GA的合成会受到抑制,但春化作用在转录水平对GA的信号激活具有正向作用。同时,春化作用能够抑制ABA的合成,减轻拮抗作用对GA信号通路的抑制,从而促进甜菜抽薹。
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