【摘 要】
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龋病是一种发病率高、波及范围广的牙体硬组织感染性疾病,能直接或间接的影响人们的全身健康。然而,现有的临床治疗手段达不到龋病防治的理想要求。将对人体无害的效应菌株定
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龋病是一种发病率高、波及范围广的牙体硬组织感染性疾病,能直接或间接的影响人们的全身健康。然而,现有的临床治疗手段达不到龋病防治的理想要求。将对人体无害的效应菌株定殖于人类微生物群中,来抑制特定病原微生物的生长繁殖,从而预防和控制细菌感染性疾病的生物替代疗法方法,被众多学者应用于口腔感染性疾病的防治研究。找到一种能够对龋病主要致病菌有抑制作用,并且对人体无害的效应菌株就成为当下急需解决的的问题。国内外大量学者研究表明,枯草芽孢杆菌分布广泛、无致病性,在食品、工业、医疗等方面均具有广泛的应用价值。并且有学者证明枯草芽孢杆菌在人类口腔中存在。因此,本研究旨在从口腔中分离枯草芽孢杆菌,验证其代谢产物对主要致龋菌是否具有抑制作用,并对其代谢产物做初步分析。方法:搔刮法提取牙菌斑,平板稀释法筛选出细菌后,进行形态学观察及16S rDNA基因序列的比对。琼脂平板打孔法检测其代谢产物对变形链球菌、粘性放线菌及嗜酸乳杆菌的抑菌活性。应用气相色谱-质谱联用技术对细菌代谢产物做检测、主成份分析法对差异代谢物进行聚类分析、偏最小二乘法建立数学模型、正交偏最小二乘法对数据进行矫正分析,最后将检测结果在KEGG数据库中映射验证。结果:从牙菌斑中分离出3株细菌,通过形态学及16S rDNA基因序列检测确定为枯草芽孢杆菌;其代谢产物对变形链球菌、粘性放线菌、嗜酸乳杆菌均具有抑制作用,其中对粘性放线菌抑制作用最强。气相色谱-质谱联用技术检测到细菌主要代谢产物有178种,在KEGG数据库中均能找到其代谢途径。结论:牙菌斑中可以分离出枯草芽孢杆菌,并且其代谢产物对主要致龋菌具有抑制作用,枯草芽孢杆菌有望作为益生菌在龋病防治中发挥重要作用。应用气相色谱-质谱联用技术可以检测出178种枯草芽孢杆菌的主要代谢产物,为枯草芽孢杆菌的优化培养和转化应用打下了一定的基础。
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