背景:乳腺癌是一种高度异质性肿瘤,根据其组织生物学特征可将其分为不同的分子亚型。三阴型乳腺癌(TNBC)是其中较特殊的亚型。因为缺乏有效的内分泌治疗和抗HER2治疗的靶点,TNBC患者难以从以上两种乳腺癌全身治疗中获益,而常规化疗被认为是TNBC仅剩的一种全身治疗手段。但是,TNBC患者的化疗疗效仍然有限,因此,提高TNBC患者对化疗药物的敏感性成为了改善三阴型乳腺癌治疗效果的策略之一。雌激素受体β(ERβ)已证实是TNBC的一种肿瘤抑制因子,ERβ高表达的TNBC患者往往具有较好的生存预后,但ERβ表达状态与三阴乳腺癌化疗疗效之间的关系仍缺乏研究。目的:观察ERβ特异性激动剂甘草素(Liq)联合多柔比星(DOX)在体内外对TNBC细胞株增殖能力的影响,研究Liq增加TNBC细胞对DOX化疗敏感性的机制,为Liq在TNBC治疗上的应用提供理论依据。方法:1.在体外研究中,选用ERβ阳性的TNBC细胞株MDA-MB-231、BT-549。运用CCK-8法、细胞克隆形成、划痕实验和Transwell实验研究Liq及Liq联合DOX对MDA-MB-231细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响;运用CCK-8法检测对照组、DOX组、Liq组、DOX+Liq联合药物组中MDA-MB-231和BT-549细胞活力的变化,观察Liq、DOX药物对TNBC细胞增殖功能的影响。2.在体内研究中,在裸鼠中构建MDA-MB-231细胞移植瘤模型,将荷瘤小鼠分为对照组、DOX组、Liq组及DOX+Liq联合组进行药物干预,观察移植瘤的生长情况。3.在机制研究中,将体外培养的MDA-MB-231细胞分为对照组、DOX组、Liq组、DOX+Liq联合药物组干预48 h后,运用Real-time PCR检测各组细胞ERβmRNA的表达;运用Western Blotting检测各组细胞ERβ、AKT、mTOR的蛋白表达并比较差异;运用Western Blotting检测不同组别裸鼠体内移植瘤中ERβ、AKT、mTOR蛋白的表达并进行比较;采用RNA干扰的方法敲低ERβ基因,明确Liq对PI3K/AKT/mTOR信号通路调控的机制。结果:1.体外实验中:Liq抑制了 MDA-MB-231细胞增殖活力,并呈剂量依赖性;小剂量Liq抑制了 MDA-MB-231细胞的活力、克隆形成、迁移和侵袭(P<0.05);Liq和DOX联合较单用DOX,使MDA-MB-231细胞的活力、克隆形成、迁移能力、侵袭能力进一步下降(P<0.05);联用Liq增强了 DOX对MDA-MB-231、BT-549细胞活力的抑制(P<0.05)。2.体内实验中:在裸鼠中成功构建MDA-MB-231细胞移植瘤模型;随机分配进行药物干预,DOX+Liq联合药物组小鼠的移植瘤体积明显小于其他各组(P<0.05)。3.机制研究中:DOX和Liq联合组较其他各组增加了体外MDA-MB-231细胞中ERβ mRNA的表达;升高了体外细胞和体内移植瘤中蛋白ERβ/β-actin的比值,降低了 pAKT/AKT、p-mTOR/mTOR 的比值(P<0.05);成功构建 MDA-MB-231细胞的ERβ沉默株(ERβKD MDA-MB-231),与NC-KD MDA-MB-231细胞相比,Liq联合DOX对ERβKD MDA-MB-231细胞抑制作用减弱。结论:1.甘草素可在体外抑制TNBC细胞株MDA-MB-231细胞增殖、迁移、侵袭的能力;甘草素和DOX联合使用可增强DOX对MDA-MB-231细胞增殖、迁徙、侵袭能力的抑制作用,可增强TNBC细胞株MDA-MB-231和BT-549对DOX的药物敏感性。2.在MDA-MB-231细胞移植瘤内,甘草素可增强DOX对MDA-MB-231细胞增殖能力的抑制。3.在MDA-MB-231细胞中,甘草素对DOX的化疗增敏作用与PI3K/AKT/mTOR信号通路的抑制有关。4.在MDA-MB-231细胞中,甘草素联合DOX对PI3K/AKT/mTOR信号通路的抑制是ERβ相关性的。