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目的:建立晚期Lewis肺癌动物模型,研究清热益气养阴中药对肺癌恶病质小鼠治疗反应状况及反映免疫平衡Th1/Th2的调节作用,探讨中药改善恶病质免疫功能紊乱,寻找适合以改善晚期肺癌生活质量的药物。
方法:采用C<,57>BL/6近交系清洁级小鼠,全部在清洁条件下饲养。(1)模型建立:取C<,57>BL/6小鼠的腋后线第6肋间,每只小鼠种植鼠源性Lewis肺癌细胞5×10<6>个/ml瘤细胞0.2ml。(2)处理:100C<,57>BL/6小鼠雌雄各半,随机分为两大组,每一大组又分为五个亚组,每五个亚组中除一组作为健康对照组(HC)不接种肿瘤外,其余四组均胸腔造模后分为甲羟孕酮组(MPA)、消炎痛组(IND)、中药组(TCM)和模型对照组(NS)。各组小鼠均在出现恶病质后开始用药,MPA组、IND组、TCM组分别按甲羟孕酮溶液(16.mgkg<-1>d<-1>)、消炎痛溶液(1mg.kg<-1>d<-1>)和清热益气养阴浓缩中药溶液(0.2ml)每日灌胃0.2ml,NS组和HC组小鼠每日用0.2ml生理盐水灌胃,连续7天。(3)观察:小鼠体重、饲料消耗量、大体和显微镜下观察胸腔、肺、纵隔、胸水等浸润转移情况;(4)检测:ELISA法检测脾淋巴细胞悬液中白介素-2(IL-2)、白介素-4(IL-4)、白介素-10(IL-10)及γ-干扰素(IFN-γ)水平;ELISA法检测血清中IL-1β水平:免疫组织化学法检测肿瘤组织IL-1β表达。
结果:
(1)小鼠生存状态:除HC组外各组小鼠均出现体重下降、摄食减少等恶病质状态,病程中小鼠出现活动减少、睡眠时间缩短、蜷曲、毛发脱落等现象,中药组生存状态好于其它各组。①体重:与HC相比,其它各组小鼠均出现不同程度的体重下降,NS组体重下降尤其明显。通过药物治疗后,TCM组和其他组比较体重下降有统计学意义(P<0.05)。②饲料消耗量:TCM组与IND组及MPA组相比较,无统计学意义(P>0.05),与NS组比较有显著差异(P<0.05)。③生存时间TCM组生存时间较MPA组及NS组明显延长(P<0.05),与IND组比较无统计学意义(P>0.05)。
(2)ELISA法检测血浆中IL-1β水平:TCM组IL-1β水平较其他实验组有所减少(P<0.05)。ELISA法检测脾淋巴细胞因子水平;TCM组IL-2水平较其他实验组有明显增加(P<0.05),而IFN-γ水平较其他实验组无明显增加(P>0.05):IL-4、IL-10水平较其他实验组有所减少(P<0.05)。
(3)免疫组化检测肿瘤组织:TCM组IL-1β表达较其他组有不同程度减少(P<0.05)。
结论:
(1)益气清热养阴中药可改善Lewis肺癌小鼠模型有生活状态。
(2)益气清热养阴中药具有调节Lewis肺癌小鼠免疫功能的作用,其可能机制是调节Th1/Th2相关细胞因子IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ水平。
(3)益气清热养阴中药对致炎性细胞因子IL-1β有一定调节作用。