目的：　　放射性肺损伤（RILI）是胸部肿瘤放疗中常见的并发症。持续存在的炎症反应、氧化应激损伤及后期纤维化是其主要病理生理特点。肺胞外基质（ECM）支架材料是离体肺经过SDS、Triton-X-100等化学灌注的方法洗脱细胞、裂解脂膜后，得到的包含较完整结构和功能的蛋白复合体的细胞外基质成分，对多种细胞学行为具有调节作用。通过进一步研磨、酶消化后将ECM支架材料制成温敏性水凝胶，能黏附于组织局部持续发挥作用。既往研究报道肺胞外基质材料有抑制炎症、氧化损伤及纤维化的作用，为阐明肺ECM对放射性肺损伤是否具有治疗作用，本研究在建立气管注射肺ECM水凝胶治疗放射性肺损伤大鼠模型的基础上，初步观察肺ECM水凝胶对大鼠放射性肺损伤的治疗作用，通过观察肺ECM水凝胶对肺泡上皮细胞间质化过程的影响，对可能的治疗机制进行探讨。　　方法及结果：　　第一部分：肺ECM水凝胶治疗放射性肺损伤大鼠模型的制备方法：　　1.肺ECM制备及组织相容性评价　　脱细胞法制备肺ECM材料，通过HE染色、电镜等检测方法验证脱细胞效率；将ECM制成水凝胶材料，并将一定剂量的水凝胶材料注射到正常大鼠皮下，1周后切除注射点周围组织，免疫荧光染色，观察材料组织相容性。　　2.放射性肺损伤大鼠模型评价　　9只大鼠，分为2组：对照组（正常大鼠，3只）、照射组（6只），单次全肺20Gy照射制备RILI模型，照射后第7天，处死，取肺，HE染色，观察肺组织病理变化。取血清，Elisa法检测TNF-α、IL-6水平变化。　　3.放射性肺损伤大鼠气管内注射肺ECM水凝胶适宜剂量的筛选　　24只RILI大鼠在照射后半小时随机分为4组，环甲膜穿刺法分别注射肺ECM水凝胶0μl、300μl、500μl、800μl，比较各组大鼠注射后半小时内死亡率、动脉血氧分压，以及采用免疫荧光染色法观察材料在气道内的分布情况。　　结果：　　1.脱细胞法成功制备肺ECM支架，HE染色及电镜检查可见有核细胞成分洗脱较彻底，胞外基质三维结构保存完好。肺ECM水凝胶皮下注射1周后观察，材料周围未见明显的炎性细胞浸润。　　2.照射后7天，肺组织HE染色显示：肺间质增厚，细胞浸入增加，局部肺泡腔可见渗出、出血。Elisa法检测结果显示：照射组大鼠血清TNF-α、IL-6分别为（98.79±12.12）pg/ml、（75.67±9.22）pg/ml；对照组大鼠血清TNF-α、IL-6分别为（57.11±9.11）pg/ml、（35.14±4.25）pg/ml，照射组显著高于对照组（P﹤0.05）。　　3.气管注射肺ECM水凝胶300μl或500μl均不会影响大鼠动脉血氧分压（P>0.05），而气管内注射800μl则会造成大鼠动脉血氧分压下降（P﹤0.05），荧光显微镜下观察，300μl、500μl、800μl组均能在肺泡表面观察到带绿色荧光的水凝胶材料分布，而800μl组可见部分水凝胶在气道内滞留。　　第二部分：肺ECM水凝胶对大鼠放射性肺损伤的治疗效果研究　　方法：　　1.肺ECM水凝胶对放射性肺损伤过程中炎症反应的作用　　54只大鼠，随机分为3组：Control组（正常大鼠，n=18）、IR+NS组（照射+气管内注射生理盐水，n=18）、IR+ECM组（照射+气管内注射肺ECM水凝胶，n=18）。于照射后第4、8、16周，每组处死6只大鼠，比较各个时间点各组：肺湿/干重比、肺组织病理变化（HE染色、Masson染色）、血清TNF-α、IL-6、TGF-β1水平（Elisa法）。　　2.肺ECM水凝胶对放射性肺损伤过程中氧化损伤的作用　　54只大鼠，随机分为3组：Control组（正常大鼠，n=18）、IR+NS组（照射+气管内注射生理盐水，n=18）、IR+ECM组（照射+气管内注射肺ECM水凝胶，n=18）。于照射后第4、8、16周，每组处死6只大鼠，取肺，测SOD活性、MDA含量。　　结果：　　1.与IR+NS组比较，在照射后第4、8、16周，IR+ECM组大鼠血清TNF-α、IL-6、TGF-β1水平下降（P＜0.05），肺组织湿/干重比降低（P﹤0.05），HE染色显示肺组织病理改变改善，Masson染色显示染蓝的胶原纤维在肺组织沉积减少。　　2.与IR+NS组比较，在照射后第4、8、16周，IR+ECM组大鼠肺组织中MDA含量减少（P﹤0.05），SOD活力增强（P﹤0.05）。　　第三部分：肺ECM水凝胶对放射诱导的肺泡上皮细胞-间质转化过程　　方法：　　1.肺ECM水凝胶对肺组织上皮间质转化水平变化的作用　　36只大鼠，分为3组：Control组（正常大鼠，n=12）、IR+NS组（照射+气管内注射生理盐水，n=12）、IR+ECM组（照射+气管内注射肺ECM水凝胶，n=12）。于照射后第4、16周，每组处死6只大鼠，取肺，免疫组化染色及western blot检测法比较各组大鼠肺组织中E-cadherin、vimentin、α-SMA水平变化。　　2.肺ECM水凝胶对肺组织中羟脯氨酸含量的影响　　36只大鼠，分为3组：Control组（正常大鼠，n=12）、IR+NS组（照射+气管内注射生理盐水，n=12）、IR+ECM组（照射+气管内注射肺ECM水凝胶，n=12）。于照射后第4、16周，每组处死6只大鼠，取肺，测羟脯氨酸含量变化（碱水法）。　　结果：　　1.与IR+NS组比较，照射后第4、16周，IR+ECM组大鼠肺组织中E-cadherin表达水平均增加，vimentin、α-SMA表达水平均降低（P﹤0.05）。　　2.与IR+NS组比较，照射后第4、16周，IR+ECM组大鼠肺组织中羟脯氨酸含量减低（P﹤0.05）。　　结论：　　1、放射性肺损伤大鼠环甲膜穿刺气管内注射500μl的肺ECM水凝胶，不会明显降低大鼠的血氧分压或增加大鼠的死亡率，且材料可以较均匀的分布于肺泡表面。　　2、气管内注射肺ECM水凝胶可以抑制放射性肺损伤大鼠全身炎症反应，减轻照射后肺组织局部的炎症、氧化损伤，并减轻后期纤维化。　　3、肺ECM水凝胶能抑制放射性肺损伤大鼠肺泡上皮细胞的上皮间质转化过程，从而减轻肺纤维化的严重程度。这可能是肺ECM水凝胶发挥治疗作用的主要机制之一。