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目的:探讨microRNA-148a(miR-148a)对胰腺癌BxPC-3细胞上皮间质转化及侵袭转移的影响及其作用机制。方法:(1)采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测33例胰腺癌组织中miR-148a的表达水平,并以其中位值分为低表达组和高表达组,分析miR-148a表达与临床病理因素的关系。(2)通过LipofectamineTM2000介导将miR-148a模拟物(mimic)转染至胰腺癌BxPC-3细胞,将细胞分为3组:Blank组(转染Lipofectamine作为空白对照组),miR-NC组(转染negative mimic作为阴性对照组),miR-148a mimic组(转染miR-148a mimic作为实验组)。转染24小时后,qPCR检测miR-148a表达水平,光学显微镜下观察细胞形态学改变,Western blot检测上皮间质转化标记物(E-cadherin、Vimentin和N-cadherin)的表达,Transwell检测细胞的迁移及侵袭能力。(3)荧光素酶报告基因试验验证miR-148a可与Wnt10b 3′UTR相结合;qPCR法检测胰腺癌组织中miR-148a与Wnt10b表达水平,并分析其相关性;miR-148a mimic/inhabitor转染胰腺癌Bx PC-3细胞,Western blot检测Wnt10b蛋白以及Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白(β-catenin、Cyclin D1和MMP-9)表达。结果:(1)miR-148a低表达组与高表达组的TNM分期、肿瘤大小差异具有显著性(P<0.05)。(2)光学显微镜观察到实验组细胞形态学发生了显著变化,表现为铺路石样上皮细胞显著增多,而阴性对照组与空白对照组仍以梭形、成纤维细胞形态的间质细胞为主。与两对照组相比,miR-148a mimic组上皮标记物E-cadherin表达显著增高(3.17±0.32 vs.1.00±0.00 vs.1.08±0.17,P<0.05),而间质表型标记物Vimentin和N-cadherin表达则明显下调(Vimentin:0.45±0.09 vs.1.00±0.00 vs.0.97±0.12;N-cadherin:0.55±0.03 vs.1.00±0.00 vs.0.94±0.06,均P<0.05)。同时,miR-148a mimic组细胞迁移及侵袭能力显著下降(迁移实验:265±53 vs.256±48 vs.83±23;侵袭实验:108±20 vs.103±13 vs.33±11,均P<0.001)。(3)双荧光素酶报告基因试验证实miR-148a可与Wnt10b 3′UTR相结合;上调胰腺癌BxPC-3细胞miR-148a的表达能显著抑制Wnt10b的表达(1.00±0.00 vs.1.03±0.08 vs.0.17±0.02,P<0.05),而下调miR-148a表达能显著上调Wnt10b表达(1.00±0.00 vs.1.12±0.19 vs.2.57±0.31,P<0.05)。胰腺癌组织中Wnt10b和miR-148a的表达水平呈负相关性(r=-0.2635,P<0.01)。以上结果表明胰腺癌中Wnt10b是miR-148a的直接作用靶基因。上调胰腺癌Bx PC-3细胞miR-148a的表达能显著下调Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白(β-catenin、Cyclin D1和MMP-9)的表达(β-catenin:1.00±0.00 vs.1.09±0.11 vs.0.27±0.05;Cyclin D1:1.00±0.00 vs.0.96±0.07 vs.0.19±0.03;MMP-9:1.00±0.00 vs.1.13±0.10vs.0.26±0.03,均P<0.05)。结论:miR-148a在胰腺癌组织中的表达与TNM分期和肿瘤大小有关。上调miR-148a可抑制胰腺癌Bx PC-3细胞上皮间质转化及侵袭转移,其作用机制与miR-148a靶向抑制Wnt10b表达并负调控Wnt/β-catenin信号通路有关。