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丙型肝炎病毒(Hepatitis C Virus,HCV)严重威胁着人类的健康,据世界卫生组织报道,全球约有七千一百万人被HCV感染,并且约80%的被感染者由急性感染转变成了慢性持续性感染,进而引起慢性肝炎、肝硬化甚至肝癌等疾病。随着研究的不断发展,治疗HCV感染的药物研究也取得了新进展,一种直接抗病毒药物sofosbuvir在2013年成为了首个治疗HCV感染的口服药物。与传统的聚乙二醇-干扰素和病毒唑联合疗法相比,sofosbuvir取得了较好的疗效。但是,高昂的治疗费用、不同基因型治疗效果有差异、病毒耐药性突变等问题依旧存在。并且迄今为止,仍没有有效的HCV疫苗。HCV在宿主细胞内的复制极其复杂,病毒粒子的进入、基因组的翻译、RNA的复制、病毒粒子的组装释放等过程都需要细胞内的宿主因子参与完成。因此,研究宿主因子在HCV复制周期中的作用以及相关机制仍然是寻找抗病毒药物的关键。EPSTI1(epithelial stromal interaction 1)为干扰素诱导基因,其在细胞凋亡、乳腺癌的发展以及免疫应答中都发挥重要作用。在本研究中,我们发现HCV感染能够诱导EPSTI1转录表达,且与病毒滴度呈正相关。我们还发现I型、II型、III型干扰素都能诱导EPSTI1的转录表达。同时,在肝癌细胞系中外源过表达EPSTI1会抑制HCV RNA和Core蛋白的表达量。而下调内源的EPSTI1,HCV RNA和Core蛋白的表达量均增加。由此说明,EPSTI1能够抑制HCV复制。进一步研究发现,EPSTI1不影响HCV的进入和病毒粒子的组装释放过程,而是抑制HCV亚基因组复制。推测其可能在HCV基因组复制过程中发挥作用。SPSB2(SPRY domain-and SOCS box-containing protein 2)为SPSB家族成员,作为一个接头蛋白,其通过SPRY结构域招募靶蛋白,并通过SOCS box结构域参与组成E3泛素连接酶ECS(Elongin BC-Cullin5-SOCS box)复合物,在宿主免疫应答中发挥重要作用。在本研究中,我们发现HCV感染能够诱导SPSB2转录表达。在肝癌细胞系中过表达SPSB2,HCV RNA和Core蛋白的表达量均降低。而下调内源的SPSB2,HCV RNA和Core蛋白的表达量均增加。同时,我们还发现,SPSB2的抗病毒功能依赖于SOCS box结构域。进一步研究发现,SPSB2和HCV结构蛋白E1及非结构蛋白NS5A都有相互作用,并且SPRY结构域的C端是SPSB2与E1以及NS5A相互作用的关键区域。同时,我们发现SPSB2能够对NS5A进行多聚泛素化修饰并通过蛋白酶体途径将其降解。综上可以表明,SPSB2可以通过和HCV非结构蛋白NS5A结合并介导其泛素化降解,从而抑制HCV的复制。ASB9(ankyrin repeat and SOCS box containing 9)为ASB家族成员,通过ANK序列与CK激酶家族成员CKB和uMtCK结合并通过C端的SOCS box结构域参与组成E3泛素连接酶ECS复合物,然后通过蛋白酶体途径将CKB和uMtCK降解。同时,ASB9还是一个重要的肿瘤抑制因子,是乳腺癌、结肠癌临床诊断的重要指标。在本研究中,我们发现,ASB9通过第一个ANK序列与HCV非结构蛋白NS5A相互作用,并且在肝癌细胞系中过表达ASB9可以抑制HCV的复制,而下调内源的ASB9则促进HCV的复制。同时,ASB9的抗病毒功能依赖其SOCS box结构域。