化痰散结中药甲肿消对甲状腺细胞凋亡影响的实验研究

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目的甲状腺肿大广泛存在于各种类型的甲状腺疾病中,主要是由于甲状腺细胞增殖>凋亡而引起的。中医治疗甲状腺肿大具有几千年的历史,而化痰散结法为基本治法,在临床上有较好的疗效。化痰散结中药分为富碘中药和非富碘两类,目前对非富碘中药作用机制研究尚少,有待进一步的阐明。通过研究化痰散结组方中药甲肿消(组方:夏枯草等)对甲状腺细胞凋亡的影响,探讨其治疗甲状腺肿大的作用机理,以期为中医临床应用化痰散结法治疗甲状腺肿大提供基础研究支撑。方法制备甲肿消含药动物血清,干预甲状腺FRTL细胞株,研究含药血清对FRTL细胞株凋亡的影响。实验共分六组:A:正常组、B:空白血清对照组(1%空白血清)、C:小剂量组(1%含药血清)、D:中剂量组(5%含药血清)、E:大剂量组(10%含药血清)、F:谷光甘肽(GSHNO)诱导凋亡对照组(2%的GSHNO)。收集各组细胞,分别提取RNA和蛋白。采用实时荧光定量PCR法检测Bax、Bcl-2的mRNA表达,Western-Blot免疫印迹法检测其蛋白表达情况。采用SPSS11.5软件分析各组细胞Bax、Bcl-2 mRNA和蛋白的表达数据,统计方法主要包括单因素方差分析、LSD-t检验、Dunnett-t检验、Tamhane检验。结果甲肿消大剂量和中剂量组能使甲状腺细胞促凋亡基因Bax的mRNA和蛋白的表达水平明显升高;各中药组Bcl-2的mRNA和蛋白表达未见统计学差异性;各中药组Bax/Bcl-2比值均有升高趋势,中剂量组差异显著(p<0.05);GSHNO诱导凋亡对照组的Bax mRNA和蛋白表达以及Bax/Bcl-2比值均明显升高。结论化痰散结中药甲肿消有促进甲状腺细胞凋亡的作用,可以上调促凋亡基因Bax的表达,提示甲肿消治疗甲状腺肿大可能是通过促进甲状腺细胞凋亡而实现,而Bax可能是其主要作用位点。
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