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本实验旨在研究胃旁路术(RXGBPS)对链脲霉菌素(streptozotocin,STZ)所致非肥胖型糖尿病小鼠模型血糖的影响,及在该过程中胰岛祖细胞所发生的变化。探讨血糖变化和胰岛祖细胞变化以及体重变化等的相互关系。
方法:
成年雄性C57BL/6小鼠经腹腔注射STZ(200mg/kg),建立非肥胖型糖尿病模型。成模后小鼠40只随机分为3组:GBP手术组(DMOP组)16只、假手术组(DMFOP组)16只、未处理组(DM组)8只,另设立正常对照组3组:正常未手术组(N组)8只、正常假手术组(NFOP组)8只和正常手术组(NOP)8只。DMOP组及DMFOP组内小鼠手术时间是STZ注射后第十天。分别测术前,术后第1、2、3、4、5、6周同一时间点各组实验动物的随机血糖及体重,同时监测饮水及尿量的变化。分别取术后第1、2、3、4周DMOP组中血糖下降明显及不明显的小鼠各一只,及于术后第4周随机抽取DM组、DMFOP组、N组,NOP组、NFOP组中小鼠一只,处死后取胰腺组织,通过HE染色和免疫荧光,观察组织学变化。
结果:
(1)与DM、DMFOP组相比,DMOP组的小鼠血糖下降明显,并可以维持到术后6周以上(实验观察结束)。(2)GBP手术后,糖尿病小鼠的体重回升,多饮、多尿的症状好转。(3)DMFOP组(15/16)与DMOP组(2/16)比较,小鼠围手术期死亡率差异明显(p<0.01)。(4)HE染色发现:与对照组小鼠相比,术后第四周的DMOP组小鼠胰岛形态接近正常胰岛,并出现新生的小胰岛,多分布在胰腺导管周围。(5)免疫荧光染色显示:胰岛数目增加,胰岛素免疫荧光发现较多孤立的及由两三个胰岛素阳性细胞组成的小胰岛。胰岛素和胰高血糖素免疫荧光双标发现在部分胰岛内存在胰岛素和胰高血糖素双阳性(INS+/GLU+)的细胞,目前,胰岛素和胰高血糖素双阳性细胞被认为是未成熟型内分泌前体细胞。同时,免疫荧光染色还发现胰腺组织内散在的表达Ngn3的细胞。Ngn3是内分泌祖细胞表达的标记物之一。
结论:
1.GBP手术对糖尿病小鼠具有降血糖作用。
2.GBP手术可以促进胰岛再生。