Class I NDV与Class II NDV气溶胶传播能力的比较研究

来源 :山东农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:YANYUGUOHOU
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目的:气溶胶传播是新城疫病毒(NDV)的主要传播方式,但过去的研究都是针对Class Ⅱ NDV。本课题的主要目的是研究Class Ⅰ NDV能否通过气溶胶传播并比较Class Ⅰ NDV和Class Ⅱ NDV的气源性传播能力。  方法:本研究建立了一个试验条件下新城疫病毒气溶胶传播模型,将两个正负压隔离器A、B通过一根管道相连,并在隔离器内饲养SPF鸡,随机分为人工感染组、接触感染组、气溶胶感染组。人工感染组和接触感染组在隔离器A中饲养,气溶胶感染组在隔离器B中饲养。人工感染组的鸡于20日龄接种Class Ⅰ NDV NX1069株。同时,在隔离器C和隔离器D进行相同试验,但接种病毒为Class Ⅱ NDV Lasota株。接种病毒后的第1、2、3、5、7、9、12、15、18、21、24、27、30、35、40天采集隔离器中的空气样品以及试验鸡口腔泄殖腔棉拭子;第7、14、21、28、35、40天采用翅静脉采血法采集试验鸡血液样品。空气样品采用蚀斑计数法分析病毒气溶胶浓度;棉拭子样品采用qRT-PCR法分析试验鸡的排毒情况;血液样品采用HI试验检测血清中的NDV抗体效价。根据试验进展对试验鸡进行剖检并采集气管样品。以Elisa法分析气管黏膜中的SIgA水平并采用16S rRNA高通量测序分析气管黏膜中的菌群成分。  结果:NDV气溶胶传播试验结果显示:隔离器A中于5dpi首次检测到Class Ⅰ NDV病毒气溶胶。隔离器A中的Class Ⅰ NDV病毒气溶胶于18dpi达到峰值13.81 × 103 PFU/m3。Class Ⅱ NDV病毒气溶胶于7dpi才首次被检测到,但是达到高峰的时间也为18dpi,峰值为13.01×103 PFU/m3。Class Ⅰ NDV隔离器B于7dpi首次检测到病毒气溶胶,但Class Ⅱ NDV隔离器D于9dpi才首次检测到病毒气溶胶。棉拭子检测结果显示:Class Ⅰ NDV气溶胶感染组的鸡于9dpi排毒而Class Ⅱ NDV气溶胶感染组则到15 dpi才排毒。HI试验结果显示:两种新城疫病毒产生的抗体滴度都很高,最高都可以达27以上。SIgA分析结果显示:Class Ⅰ NDV接触传播和气溶胶传播都可以使气管黏膜SIgA水平显著升高,接触传播和气溶胶传播之间无显著性差异。高通量测序的结果显示:Class Ⅰ NDV接触传播与气溶胶传播引起气管黏膜菌群的变化不同。接触组和气溶胶组都会使呼吸道菌群多样性下降,但气溶胶组与空白组的呼吸道相同菌仅有21种,接触组与空白组有49种。气溶胶感染组与空白组的呼吸道黏膜菌群差异更大。属水平细菌丰度检测结果显示接触感染后气管黏膜中丰度上升的菌属多为条件致病菌:如埃希氏-志贺氏菌等,而气溶胶感染组丰度上升最大的菌属为乳酸菌属。  结论:Class Ⅰ NDV可以形成病毒气溶胶,而且病毒气溶胶可以扩散到相邻的隔离器中。本试验中,Class Ⅰ NDV比Class Ⅱ NDV形成病毒气溶胶的时间更早,Class Ⅰ NDV气溶胶感染组的试验鸡排毒时间也更早。Class Ⅰ NDV通过不同传播途径感染都可以使气管黏膜SIgA水平显著上升。气溶胶感染组会使气管黏膜菌群变化更大,但直接接触感染更容易继发气管黏膜上存在的条件致病菌感染。
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