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目的:
1.研究失血性休克大鼠血浆凝血纤溶功能的变化以及参附注射液的干预作用.
2.观察失血性休克大鼠血清调节内皮细胞表达凝血-抗凝-纤溶分子的作用.
方法:
1.成年健康Sprague DaWley(SD)大鼠分成5组:对照组,假休克组,休克组,林格液复苏组,参附复苏组.除对照组和假休克组外,其余大鼠均放血至40mmHg60分钟,然后休克组不复苏,林格液组用3倍失血量的液体复苏;参附组用含参附注射液(10ml/kg)和林格液组成的3倍失血量的液体复苏.复苏后2小时取血,用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测血浆t-PA、PAI-1和TF.
2.留取假休克组、休克组血清,并将胎牛血清作为正常对照组,无菌处理后加入到培养基,分别与内皮细胞分别培养6小时、12小时和18小时,用流式细胞术检测人脐静脉内皮细胞表面TF的表达水平;用逆转录-聚合酶链反应检测休克血清刺激后内皮细胞TF、TM、t-PA和PAI-1 mRNA的表达.
结果:
1.与假休克组比较,休克组、林格组和参附组血浆t-PA、t-PA/PAI-1均明显升高(P<0.01),且林格组和参附组均明显高于休克组(P<0.01);休克组和林格组血浆TF含量均明显高于假休克组和参附组(P<0.01).
2.细胞培养6小时,各血清处理组,细胞表面TF的变化均无统计学意义(P>0.05).与正常对照组及假休克组相比,休克组血清刺激HUVECsl2小时后,TF升高,具有明显统计学意义(P<0.01),184、时差别仍有统计学意义.
3.与正常对照组相比,休克组血清刺激SVAREC6小时后,TF,TM和t-PAmRNA均升高,具有统计学意义,18小时升高仍具有统计学意义.与正常对照组及假休克组相比,休克组血清刺激SVARECl2小时后,PAI-1 mRNA升高,有统计学意义(P<0.05);培养18小时后,与正常对照组比,PAI-1mRNA升高,有显著统计学意义(P<0.01).
结论:
1.凝血纤溶系统可能在失血性休克的发生发展中起着重要作用,失血性休克早期TF和t-PA表达升高,机体呈高凝状态,纤溶功能增强.参附可调节凝血纤溶系统,从而遏制失血性休克凝血功能紊乱的发展,可能是其抗休克的机制之一.
2.失血性休克血清上调内皮细胞TF抗原及TF、TM、t-PA和PAI-1 mRNA表达,是失血性休克内皮细胞功能不全的表现之一,提示休克血清对内皮细胞有损伤作用,休克中应注意保护内皮细胞.