抗草甘膦转基因大豆的获得及后代分析

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大豆(Glycine max(L.)Merr)是主要的油料作物之一,在世界上广泛种植。在影响大豆生产的众多因素中,草害是最重要的因素之一。美国使用的抗除草剂转基因大豆已获得了巨大成功,给我国的大豆产业造成了严重的冲击,因此研发具有我国自主知识产权的转基因大豆具有重要的战略意义。本研究以栽培大豆为受体材料,采用农杆菌介导的子叶节法,将草甘膦抗性基因G10-EPSPS成功转入大豆,并对获得的转化后代进行分析。主要结果如下:1.转基因植株的获得:对20个来自中国不同产区的大豆品种进行抗草甘膦基因的遗传转化,统计其诱导率、伸长率和转化效率,转化效率最高为2.94%。经过筛选,获得了3个品种(WD28,22,31)共8株转化体材料,7个植株表现出较好抗性,正常结实。2.转基因植株后代的检测及分离情况:对转化体的T1代进行PCR检测,均获得目的片段。同时对22的2株转化体取其叶片进行Western-blot检测,结果表明,目的蛋白EPSPS在22中稳定表达。对获得的WD28的T1代喷施1/150(体积比)的41%的草甘膦异丙胺盐(孟山都)来进行抗性检测,根据转化体的抗性表现进行X2分析,结果表明除WD28-2外,其余转化体均符合孟德尔遗传规律(3:1)。3.转基因植株后代农艺性状:对WD28-2进行了田间农艺性状分析,该转化体的T1代植株从株高,节数,荚数等方面与对照植株均无差异。对WD28-2进行了T2代的抗性鉴定,结果表明该株系在T2代出现了植株叶片顶端变黄的现象,抗性不佳。
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