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研究目的：
(1)比较人胚肾细胞株293和肾癌细胞株OS-RC-2细胞迁移能力的差异。
(2)检测上述细胞株中核迁移蛋白NudC(NucleardistributiongeneC的表达产物)、有丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶3(mitogen-activatedproteinkinasekinasekinase3,MEKK3)和c-Jun氨基末端激酶(c-JunNH2-terminalkinases,JNK)等信号转导分子的表达和活性,分析它们与肾癌细胞迁移活性的关系。
研究方法：
(1)采用Transwell方法比较293和OS-RC-2两个细胞株的迁移能力。
(2)采用RT-PCR方法检测MEKK3和NudCmRNA在胚肾细胞株293和肾癌细胞株OS-RC-2中的表达。
(3)采用Westernblotting方法检测NudC、MEKK3、和JNK蛋白在293和OS-RC-2细胞株中的表达,p-MEKK3和p-JNK在两个细胞株的水平,以及两个细胞株的细胞核内NudC的表达差异。
(4)采用免疫荧光方法检测NudC在293和OS-RC-2细胞株的定位。
研究结果：
(1)细胞迁移结果显示,肾癌细胞株OS-RC-2的迁移能力明显高于胚肾细胞株293。
(2)在mRNA水平,人肾癌细胞株OS-RC-2中MEKK3和NudC表达均明显高于人胚肾细胞株293。
(3)在蛋白水平,人肾癌细胞株OS-RC-2中MEKK3和JNK的磷酸化水平均高于人胚肾细胞株293。
(4)免疫荧光结果和细胞核蛋白表达结果显示NudC在人肾癌细胞株OS-RC-2的核内表达明显高于人胚肾细胞株293。
结论：
MEKK3和JNK的磷酸化水平在肾癌细胞株OS-RC-2含量增加,NudC在肾癌细胞株核内的表达明显高于正常细胞株,提示NudC以及信号相关分子MEKK3、JNK与肾癌细胞迁移性密切相关。