红芪谱—效相关性及红芪多糖防治肝纤维化性骨丢失的探讨

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红芪是我国传统中药材,从古至今应用广泛。本文利用高效液相色谱串联二极管阵列检测器的方法,通过优化一系列色谱条件,测定了不同产地红芪提取物的指纹图谱,鉴定了其中3~5种化学成分。依循中医理论中红芪补气升阳,益气固表,敛疮生肌的功效,在现代研究中探讨其抗肝纤维化及改善骨质疏松的作用,同时结合多种统计学方法,确定发挥药效的物质基础,筛选红芪优良产地,为进一步开发其市场价值提供了基础。红芪多糖是利用水提醇沉法得到的杂多糖,在提高免疫力,抗肿瘤,抗病毒等方面发挥作用。由现代研究可知,肝纤维化作为原始病机亦引起多种骨相关疾病,故而本文将两种病症结合起来,探讨红芪多糖对肝纤维化性骨丢失的防治作用。本论文分以下三个章节来展开:第一章红芪药材抗肝纤维化作用的谱效关系研究利用40%四氯化碳花生油溶液皮下注射造成小鼠肝纤维化模型,测定血液中谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总蛋白、白蛋白、球蛋白含量及肝脏指数,运用灰色关联度法及偏最小二乘法研究红芪发挥作用的主要成分,筛选优良产地。结果表明,不同产地红芪对肝纤维化均有改善作用,且芒柄花素、芒柄花苷、毛蕊异黄酮等成分为主要发挥作用的药效物质基础。第二章红芪药材改善骨质疏松的谱效关系研究峰值骨量是生物体在生命周期自然生长过程中所能达到的最大骨量值,能有效反应骨质疏松状况。基于此,采用刚离乳大鼠,自其幼年时期给予红芪提取物直至成年期,达到最大峰值骨量后测定骨密度、骨弹性模量、屈服强度、最大载荷、血钙、血磷、碱性磷酸酶、抗酒石酸酸性磷酸酶各项指标,全面反映其峰值骨量的变化。运用灰色关联度法研究红芪中主要发挥作用的药效物质,同时利用因子分析和聚类分析筛选红芪优良产地。结果表明,10批红芪药材均能提高大鼠峰值骨量,将其共有成分分为三个区段,则芒柄花素、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、腺苷、毛蕊异黄酮苷均处于发挥疗效的高、中区段,对药效有一定贡献。最优产地为陇南官亭。第三章红芪多糖对肝纤维化性骨丢失的防治作用采用20%四氯化碳橄榄油溶液皮下注射造成小鼠肝纤维化,一月后,测定肝纤维化血清指标,且制备肝脏切片,采用苏木精-伊红染色(HE)及三色染色(MASSON)观察其组织病理学变化,用Ridit分析进行等级秩和检验;测定了骨血清指标实时监测骨中矿物质含量变化,采用消化法测定股骨中羟脯氨酸含量。结果表明,四氯化碳所致肝纤维化确引起骨含量变化,且红芪多糖对两种病症均有明显改善作用。
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