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β-甘露聚糖酶来源广泛,包括植物,动物和微生物。微生物是理想的β-甘露聚糖酶来源,基于它们具有较高的酶生产力,且易于培养。迄今为止,只有为数不多的几个来源于青霉的β-甘露聚糖酶基因被克隆和表达。本研究采用基因工程技术从一株青霉(Penicillium freii F63)菌中克隆一条新颖的耐碱第5家族β-甘露聚糖酶基因,于毕赤酵母GS115中高效表达重组酶,达到电泳纯级别,能够在宽广的酸碱条件下表现较高的酶活力,并在碱性条件下保持较好的稳定性。采用降落PCR方法,使用β-甘露聚糖酶兼并引物(