目的:本研究通过对121株碳青霉烯类抗生素耐药或中介耐药的大肠埃希菌进行碳青霉烯酶及β-内酰胺酶的检测,旨在阐明产碳青霉烯酶大肠埃希菌耐药机制;通过分析产碳青霉烯酶大肠埃希菌的基因同源性及分子分型,旨在探讨碳青霉烯酶基因是否存在克隆传播及流行的分型。方法:琼脂稀释法测定抗生素对大肠埃希菌的最低抑菌浓度(MIC)。PCR特异扩增、测序分析和接合试验研究大肠埃希菌对碳青霉烯类抗生素耐药的分子机制。脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型(MLST)研究产碳青霉烯酶菌株的同源性和分子分型。结果:分离得到碳青霉烯类抗生素耐药或中介耐药的大肠埃希菌共121株,这些菌株对美罗培南、亚胺培南和厄他培南的MIC范围分别为2-256μg/ml、4->256μg/ml、4->256μg/ml,对其它β-内酰胺类抗生素和环丙沙星耐药水平较高。其中97株大肠埃希菌产KPC-2型碳青霉烯酶,4株大肠埃希菌产NDM-1型碳青霉烯酶,20株细菌未检测到碳青霉烯酶。TEM-1和CTX-M-1/-M-9/组β-内酰胺酶的检出率较高,多数菌株同时产多种酶。大部分菌株(103株)可通过接合试验将碳青霉烯类抗生素耐药性传递给J53。PFGE显示部分菌株具有同源性,存在克隆传播现象。MLST显示存在14种序列类型,其中最常见的是ST131(51株)和ST405(29株)。结论:碳青霉烯酶尤其KPC-2型碳青霉烯酶的产生是本院大肠埃希菌对碳青霉烯类抗生素耐药或中介耐药的主要原因,存在耐药菌株以克隆株的形式传播。而产NDM-1型碳青霉烯酶的大肠埃希菌在2013年和2014年均有分离得到,但菌株呈现克隆多样性。ST131和ST405是产碳青霉烯酶大肠埃希菌的优势ST型。