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目的：1.观察双秦眼用凝胶对实验性小鼠单疱病毒性角膜炎的干预作用。2.探讨双秦眼用凝胶对实验性小鼠单疱病毒性角膜炎的复发的影响。3.探讨双秦眼用凝胶对实验性小鼠复发性单疱病毒性角膜炎的干预作用。方法：1.用角膜病毒接种法给BALB/c小鼠接种1型单纯疱疹病毒(HSV-1)SM44株,随机分为对照组,无环鸟苷(ACV)组,双秦眼用凝胶组,模拟感染组,正常组。连续给药2周,通过对角膜病变及结膜病变评分、角膜组织病理观察以及反转录聚合酶链反应(reversetranscriptionpolymerasechainreaction, RT-PCR)检测潜伏相关转录体(latency associated transcripts, LAT)在三叉神经节(trigeminal ganglion, TG)内的表达情况综合评价双秦眼用凝胶对HSK模型小鼠的药效及作用机制。2.用角膜病毒接种法给BALB/c鼠接种单纯疱疹病毒1型(HSV-1)SM44株,随机分为对照组,ACV组,双秦眼用凝胶组,模拟感染组,正常组。连续给药2周,停止用药6周后紫外线B(UV-B)光照射,诱导HSK复发,观察各组小鼠复发率、角膜组织结构、TG内HSV-1的潜伏及LAT的表达情况。3.用角膜病毒接种法给BALB/c小鼠接种单纯疱疹病毒1型(HSV-1)SM44株,抗病毒血清干预,饲养6周后,UV-B光照射小鼠角膜,诱导HSK复发,随机分为对照组,ACV组,双秦眼用凝胶组,ACV+可的松组,模拟感染组,正常组,治疗14d。观察各组小鼠UV-B光照射角膜诱导复发后第1、3、5、7、10、12、14天的角膜、结膜变化并评分、HE染色观察角膜组织结构、免疫组织化学方法检测各组复发性HSK小鼠角膜内白细胞介素-17(interleukin-17, IL-17)的表达、ELISA方法检测角膜内肿瘤坏死因子.α(tumor necrosis factor-α, TNF-a)的含量。结果：1.角膜病变评分显示：D3～D14,双秦眼用凝胶组角膜评分下降幅度优于对照组(p<0.01)；D9-D14,ACV组角膜评分下降幅度优于对照组(p<0.01)；组内比较,D14,各组小鼠角膜评分均较D1显著下降(p<0.01)；D14,双秦眼用凝胶组与ACV组角膜评分均较D3显著下降,差异有显著统计学意义(p<0.01),对照组角膜评分与D3比较差异无统计学意义。结膜病变评分显示：D7-D14,双秦眼用凝胶组结膜评分下降幅度明显优于对照组(p<0.01)；D9、D13, ACV组结膜评分下降幅度明显优于对照组,差异有显著统计学意义(p<0.01), D14, ACV组结膜评分下降幅度优于对照组,差异有统计学意义(p<0.05)；各组小鼠组内比较结果显示,与造模后D1相比,D14,各组小鼠结膜评分均较D1显著下降,差异有显著统计学意义(p<0.01)；D14,双秦眼用凝胶组的结膜评分均较D3显著下降,差异有显著统计学意义(p<0.01),而对照组与ACV组结膜评分与D3无统计学意义(p>0.05)。角膜组织病理学观察发现,双秦眼用凝胶组角膜各层结构大致正常,双秦眼用凝胶组与对照组、ACV组相比差异均有统计学意义(p<0.05)。RT-PCR检测各组小鼠TG内LATmRNA半定量RT-PCR灰度值,结果显示,双秦眼用凝胶对TG内LAT的表达的抑制作用优于对照组(p<0.05),而ACV抑制LAT表达的作用不明显。2.UV-B光照射小鼠角膜诱导HSK复发后1-7d,各组病毒检出率均呈不同程度的升高；在诱导复发后7天的泪液膜擦拭液里,除D3双秦眼用凝胶组的泪膜擦拭液里的病毒检出率高于ACV组外,其余几天,双秦眼用凝胶组的病毒检出率均低于其余二组。但是,比较各组间每天的病毒检出率,无显著统计学差异(p>0.05)；角膜组织病理学观察发现,诱导复发后,对照组及ACV组角膜均有不同程度的损伤,双秦眼用凝胶组角膜各层结构大致正常；双秦眼用凝胶组TG内HSV-1的潜伏及LAT的表达均受到抑制；用PCR技术检测各组小鼠TG内HSV-1DNA的灰度值,结果显示,双秦眼用凝胶优于对照组(p<0.05)及ACV组(p<0.01)；应用RT-PCR技术检测并比较各组小鼠TG内LATmRNA的灰度值,双秦眼用凝胶亦优于对照组(p<0.01)及ACV组(p<0.05)。3.治疗14天后,双秦眼用凝胶组、ACV组和可的松组三组小鼠的角膜病变评分均有大幅下降,且和对照组相比,差异有统计学意义(p<0.05)；治疗14天后,3个治疗组对小鼠的结膜病变均有一定的治疗作用,其中以双秦眼用凝胶组和可的松组最为明显(p<0.01)。各组复发性HSK小鼠角膜病理切片HE染色结果显示,双秦眼用凝胶组基质层轻度水肿,各层结构大致正常,双秦眼用凝胶对复发性小鼠的角膜的保护作用较其余各组明显；免疫组织化学方法检测各组复发性HSK小鼠角膜内IL-17抗体阳性细胞的表达结果显示,与对照组比较,双秦眼用凝胶组和可的松组均有显著的统计学差异,ACV组有统计学差异；ELISA方法检测角膜内TNF-α的含量结果显示,双秦眼用凝胶组和ACV组和对照组比较,均有统计学差异。结论：1.双秦眼用凝胶不仅可以减轻HSK的病变程度、保护角膜正常的组织结构,而且可以抑制LAT在TG内的表达。2.双秦眼用凝胶在一定程度上可以降低HSK小鼠泪液膜擦拭液的病毒检出率,减轻UV-B光照射后角膜病变体征、保护角膜的组织结构、抑制TG内HSV-1的潜伏和LAT的表达,但是其抗复发作用及机制尚有待进一步探讨。3.双秦眼用凝胶对于复发性HSK同样具有一定的治疗作用,在病变的早期即发挥保护角膜和结膜、减少损伤的作用,在一定程度上维持了角膜结构的完整,我们推测其是通过抑制角膜内IL-17的表达,降低角膜内TNF-α的含量,抑制TNF-α诱导的细胞凋亡发挥作用的。