鸡滑液囊支原体与传染性支气管炎病毒、H9亚型禽流感病毒和新城疫弱毒疫苗协同致病作用的研究

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滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)是一种常见的鸡呼吸道病原体,在鸡群中的感染率很高。MS是条件致病性菌,其致病作用常需要其他因素的协同。在某些情况下,即使弱毒疫苗引起的轻微呼吸道损伤,也会给MS的感染创造机会。当MS与其它病原混合感染或存在环境应激因素时,会引起呼吸道症状、滑膜炎、产蛋量和蛋品质下降,给养鸡业造成较大的经济损失。本研究将分别探讨MS与传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)、H9亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)、新城疫(Newcastle disease virus,NDV)弱毒疫苗之间存在协同致病作用。1.MS与IBV协同致病作用的研究将60只1日龄SPF鸡随机均分为4组,分别为MS组、IBV组、MS+IBV组和空白对照组,在负压隔离器中进行试验。待SPF鸡14日龄时,对MS组和MS+IBV组的试验鸡通过滴鼻点眼方式接种MS Ningxia/2017-1株,感染剂量为2.0×108.0CCU/鸡;间隔3日,IBV组和MS+IBV组的试验鸡通过滴鼻点眼方式接种IBV CK/CH/JS/2010/12株,感染剂量为105.5EID50/鸡。试验从MS攻毒起共计14天,每天观察并记录试验鸡的发病和死亡情况。在接种MS后第3、7、10和14天采集血清和腭裂拭子,测定血清中MS和IBV的抗体效价以及腭裂拭子中MS载量。临床结果显示,对照组和MS组未观察到临床症状;IBV组3/15试验鸡表现出呼吸道症状,1/15死亡;MS+IBV组7/15试验鸡表现出严重的呼吸道症状,3/15死亡。相较于对照组、MS组和IBV组,MS+IBV组体重增长明显减慢。剖检显示,MS+IBV组出现气囊炎和气管出血且7/15试验鸡有腹膜炎,而MS组仅表现轻微的气囊病变。MS+IBV组中MS抗体阳性率明显高于MS组,且MS攻毒第3、7、10和14天时,IBV组血清中抗体阳性率分别为0/15、6/15、11/15 和 14/14,MS+IBV 组中 IBV 抗体阳性率分别为 0/15、15/15、14/14 和 12/12。在MS攻毒第7和10天时,MS+IBV组呼吸道中MS排毒量显著高于MS组,在MS攻毒第14天时,MS组呼吸道中检测不到MS的排毒,而MS+IBV组呼吸道中MS的排毒量依然维持在较高水平。结果表明,在MS Ningxia/2017-1株感染条件下,IBV CK/CH/JS/2010/12株的临床发病率及死亡率出现明显升高;同时IBV CK/CH/JS/2010/12株亦可使MS Ningxia/2017-1株的排毒量增加,致病力增强。2.MS与H9亚型AIV协同致病作用的研究将80只1日龄SPF鸡随机分为4组,分别为MS组、H9 AIV组、MS+H9AIV组和空白对照组,在负压隔离器中进行试验。待SPF鸡14日龄时,MS组和MS+H9 AIV组通过滴鼻点眼方式接种MS Ningxia/2017-1株,感染剂量为2.0×108.0CCU/鸡;间隔3日,H9AIV组和MS+H9AIV组通过滴鼻点眼方式接种H9亚型AIV A/Chicken/Shandong/QD4/2013 株,感染剂量为 108.3 EID50/鸡。试验从 MS 攻毒起共计28天,每天观察并记录试验鸡的发病和死亡情况。MS攻毒后第3、7、10、14、21和28天采集血清和腭裂拭子,测定血清中MS和H9亚型AIV抗体效价和腭裂拭子中MS和H9亚型AIV的载量。结果显示,接种H9亚型AIV后,MS+H9 AIV组中部分试验鸡(5/20)出现呼吸道症状,其余组均无症状。剖检时MS+H9AIV组出现气囊炎和胸骨部位囊肿,而MS组只有轻微气囊病变,对照组和H9 AIV组均未出现任何病变。相较于其他3组,MS+H9 AIV组体重增长明显减慢。同时MS+H9 AIV组可以诱导产生较高水平的MS抗体效价。MS+H9AIV组呼吸道MS排毒量显著高于MS组,MS+H9 AIV组呼吸道排毒量显著高于H9亚型AIV组。结果表明,在MS和H9亚型AIV共同感染的情况下,临床发病率升高,甚至出现死亡病例。3.MS与ND弱毒疫苗协同致病作用的研究将80只1日龄SPF鸡随机分为4组,分别为MS组、ND弱毒疫苗组、MS+ND弱毒疫苗组和空白对照组,在负压隔离器中进行试验。待SPF鸡14日龄时,MS组和MS+ND弱毒疫苗组通过滴鼻点眼方式接种MS Ningxia/2017-1株,感染剂量为2.0×108.0CCU/鸡;间隔3日,ND弱毒疫苗组和MS+ND弱毒疫苗组通过滴鼻点眼接种ND弱毒疫苗(LaSota株),感染剂量为106.5 EID50/鸡。试验从MS攻毒起共计28天,每天观察并记录试验鸡的发病和死亡情况。MS攻毒后第3、7、10、14、21和28天采集血清和腭裂拭子,测定血清MS、NDV抗体效价和腭裂拭子中MS、NDV载量。临床结果显示,接种MS后,MS+ND弱毒疫苗组表现呼吸道症状(5/20)和眼结膜充血(1/20),其余组均无症状。剖检时在MS+ND弱毒疫苗组发现气囊病变、肾脏肿大和脾脏肿大,其余组均无剖检病变。相较于MS组,MS+ND弱毒疫苗组可以诱导产生较高水平的MS抗体效价。MS攻毒第21天时,ND弱毒疫苗组血清NDV抗体效价高于MS+ND弱毒疫苗组。试验期间MS+ND弱毒疫苗组呼吸道MS排毒量显著高于MS组,MS+ND弱毒疫苗组呼吸道NDV排毒量显著高于ND弱毒疫苗组。结果表明,ND弱毒疫苗亦能使MS的致病力增强。综上所述,本研究采用实验证明在感染MS的情况下,再混合感染IBV、H9亚型AIV等呼吸道病原,甚至接种新城疫弱毒疫苗,都可能造成严重的临床症状和病理变化,影响鸡的生长发育,造成严重的经济损失,进一步证明开展MS净化的重要性和必要性。
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