棉花黄萎病蛋白质组学研究及GbCHI基因功能分析

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棉花是我国重要的经济作物,棉花黄萎病主要是由大丽轮枝菌引起的土传维管束病害。黄萎病已成为严重影响棉花产量与棉纤维品质的重要真菌性病害,目前国内外在黄萎病防治以及抗病育种方面尚未取得显著进展。本实验以海岛棉7124为材料,利用双向电泳和质谱分析技术比较侵菌和未侵菌的棉花根部蛋白质组差异来研究海岛棉与大丽轮枝菌之间的防卫反应机制。得到以下研究结果:1、从抗黄萎病品种海岛棉7124中鉴定出51个上调和18个下调的蛋白。这些蛋白主要包括防卫应答相关蛋白,初级与次级代谢相关蛋白,脂质运输与细胞骨架相关蛋白。2、利用比较蛋白质组学方法从海岛棉7124根部蛋白中分离到受棉花黄萎病病原菌诱导的几丁质酶,克隆了GbCHI基因的cDNA序列。3、对GbCHI基因的表达特征及其蛋白的抑菌功能等进行了分析鉴定。qRT-PCR分析表明GbCHI基因在棉花根、茎、叶、花和胚珠中均有表达。4、GbCHI基因表达受大丽轮枝菌、水杨酸(SA)、乙烯(ACC)和茉莉酸(JA)诱导;亚细胞定位分析显示GbCHI蛋白主要分布在细胞膜上。5、体外抑菌实验证明GbCHI蛋白能显著抑制大丽轮枝菌孢子的萌发和菌丝的生长。这些研究结果为了解GbCHI的功能及其在棉花黄萎病抗性分子育种中的应用提供了实验依据和思路。
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