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目的:通过观察中药女贞子对大鼠脊髓损伤后NOS表达及动物行为学BBB评分的影响,探讨女贞子对大鼠脊髓损伤的作用机制。 方法:选用90只健康的清洁级大鼠,雄性,体重230~270g,实验动物分为假手术组,损伤组和治疗组3组。治疗组取女贞子液(3.0g/Kg·d)腹腔注射,损伤组与假手术组腹腔注射与治疗组相同体积的生理盐水。在造模成功6个时间点:1h,6h,24h,3d,6d,14d取出脊髓标本进行脊髓病理形态学观察,并通过免疫组织化学方法检测脊髓组织中NOS的表达,采用光密度值(OD值)检测NOS的阳性表达率,并于各个时间点观察动物行为学的改变。 结果:(1)病理形态学结果显示:使用女贞子液治疗后脊髓大体标本及HE染色较损伤组减轻。(2)NOS免疫组织化学方法结果显示:NOS主要表达在神经元、神经胶质细胞、血管内皮细胞和室管膜细胞中。假手术组脊髓组织中6h,24h,3d有少量NOS表达,3d以后几乎没有表达;损伤组1h既有少量的NOS表达,24h表达增多,损伤后3d脊髓组织中NOS表达达到高峰;女贞子治疗组脊髓组织中NOS的表达在1h没有明显改变,24h后所有时间点较损伤组明显减弱,差异有统计学意义(p<0.05)。(3)BBB评分法评判大鼠后肢运动功能结果显示:大鼠BBB评分女贞子治疗组高于损伤组,差异有统计学意义(p<0.05)。 结论:(1)Allen法制造大鼠脊髓损伤模拟人类脊髓损伤的过程,操作简单,可重复性好,临床相似度高。(2)女贞子能明显改善大鼠脊髓损伤后组织病理学改变,并且能减轻脊髓组织因出血、水肿引起的继发性损伤,表明女贞子对大鼠脊髓损伤有明显的保护及修复作用。(3)女贞子可明显降低损伤后脊髓组织NOS的表达,并且能够减少表达范围,提示女贞子降低损伤后脊髓组织NOS的表达可能是女贞子保护脊髓损伤的作用机理之一。(4)女贞子能在脊髓损伤后早期有效清除自由基,并抑制神经细胞凋亡,表明女贞子具有抗氧化,降低自由基含量,保护神经细胞及促使损伤神经早期恢复功能的作用。