【摘 要】
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Sirtuins蛋白家族是一类重要的生理调节因子,有SIRT1-SIRT7 7名成员组成,这些蛋白对于能量代谢、线粒体功能调节、细胞周期调节等过程中发挥着重要作用,某些成员参与了卵母细胞成熟的调节并对早期胚胎的发育起着重要作用。目前关于SIRT5的研究很多,然而关于SIRT5影响卵母细胞成熟等生理过程的报道还很少。因此本试验以小鼠卵母细胞为试验对象,旨在探究SIRT5在调控小鼠卵母细胞成熟以及早期
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Sirtuins蛋白家族是一类重要的生理调节因子,有SIRT1-SIRT7 7名成员组成,这些蛋白对于能量代谢、线粒体功能调节、细胞周期调节等过程中发挥着重要作用,某些成员参与了卵母细胞成熟的调节并对早期胚胎的发育起着重要作用。目前关于SIRT5的研究很多,然而关于SIRT5影响卵母细胞成熟等生理过程的报道还很少。因此本试验以小鼠卵母细胞为试验对象,旨在探究SIRT5在调控小鼠卵母细胞成熟以及早期胚胎发育中的作用,主要的试验过程以及试验结果如下:试验一:SIRT5对小鼠卵母细胞体外成熟的影响。本研究探讨了添加SIRT5抑制剂对小鼠卵母细胞体外成熟的影响及其潜在的机制。结果表明,在体外成熟的过程中抑制SIRT5蛋白的表达会降低卵母细胞的发育能力,具体表现在:经SIRT5抑制剂处理后,卵母细胞的成熟率明显降低,相比于对照组具有显著性差异（P<0.05）;此外,经SIRT5抑制剂处理后,检测出小鼠卵母细胞内ROS的水平显著升高（P<0.05）,GSH水平则恰恰相反,呈显著降低的趋势（P<0.05）,线粒体膜电位水平与GSH相似,也是显著降低（P<0.05）;同时,在体外成熟过程中,经SIRT5抑制剂处理的小鼠卵母细胞的抗氧化相关基因SOD1和GPX3的m RNA水平显著低于对照组的卵母细胞（P<0.05）。试验二:SIRT5对小鼠早期胚胎发育的影响。本试验探究了SIRT5对小鼠卵母细胞受精后早期胚胎发育的影响及潜在机制。结果表明,在体外培养中抑制SIRT5蛋白的表达后,早期胚胎的发育能力降低,具体表现在:经SIRT5抑制剂处理后,早期胚胎的卵裂率和囊胚率显著低于对照组（P<0.05）,囊胚内细胞总数也显著低于对照组（P<0.05）,而囊胚内细胞凋亡率则是显著升高（P<0.05）;此外,经SIRT5抑制剂处理后2-细胞期早期胚胎中的ROS的水平显著升高（P<0.05）,GSH水平则显著低于对照组（P<0.05）,线粒体膜电位水平也显著低于对照组（P<0.05）;另外,本研究还发现,处理组2-细胞内的抗氧化相关基因SOD1、CAT和GPX3以及胚胎全能性相关基因H19、OCT4的m RNA水平显著降低。综上,本研究表明卵母细胞内正常的SIRT5水平对于维持卵母细胞内氧化还原稳态是必不可少的,并且SIRT5对于卵母细胞的成熟和早期胚胎的发育也是至关重要的。
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