随着社会的不断进步、环境及生活方式的改变，疾病谱发生了根本变化，恶性肿瘤的发病率和死亡率逐年增高。目前，我国恶性肿瘤的死亡率已居各类疾病死因的首位。其中，患者死亡的主要原因是肿瘤的复发和转移，而肿瘤干细胞是肿瘤复发和转移的主要原因。因此，以肿瘤干细胞为靶点的抗肿瘤治疗已成为目前肿瘤学研究的热点之一。肿瘤干细胞是一小群具有无限自我更新能力及分化能力的干细胞样细胞，其显著的生物学特征是高表达胚胎干细胞样基因Oct4，而该基因可以调控下游多个基因的表达[14]。Oct4是维持干细胞自我更新能力及分化能力的一种关键性转录因子，目前已有研究表明，高表达Oct4与肿瘤干细胞及肿瘤的预后有关。高表达Oct4可使干细胞的自我更新能力及分化能力相对增强，而通过基因敲除技术将Oct4基因敲除后可使细胞的生长受抑制，同时分化能力也大大减弱[15]。力达霉素是一种新研发的具有高效抗肿瘤活性的抗生素。目前已有数据证实力达霉素可在体内、外通过阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡、抑制肿瘤血管形成等多种机制抑制多种肿瘤细胞的生长[1-4]。小鼠胚胎癌细胞P19是从C3H/He鼠胚胎来源的畸胎瘤中分离得到的，具有与多能性的胚胎干细胞（embryonic stem cell，ES cell)极为相似的生物学特征，高表达囊胚内胚团的标记物Oct4，因此该细胞是研究肿瘤干细胞的理想模型。前期实验证实了低剂量（0.01nmol）力达霉素处理小鼠P19细胞后该细胞出现明显的生长抑制，经流式细胞分析检测发现该细胞发生了细胞周期G1期阻滞。同时在该过程中我们还发现P19细胞出现了明显的转录因子Oct4表达下降。为了证实此过程中出现的Oct4下调与细胞周期G1期阻滞是否存在内在关系，我们对低剂量力达霉素抑制小鼠胚胎癌细胞P19的生长机制进行了研究。首先我们应用流式细胞分析技术检测了经低剂量力达霉素处理的P19细胞，结果显示随着药物作用时间延长，P19细胞停留在细胞周期G1期的比率逐渐增多。我们采用Western blot、免疫荧光染色以及RT-qPCR方法分别在蛋白质和mRNA水平在药物作用的不同时间点检测了经低剂量力达霉素处理的P19细胞中Oct4、P53以及P21的变化，结果显示随着药物作用时间延长，Oct4的表达逐渐下降，P53的表达逐渐增强，并且两者呈现明显的时间依赖性，同时细胞周期蛋白P21的表达逐渐增强。然后，通过染色质免疫共沉淀实验（ChIP）以及荧光素酶活性分析实验共同证实了Oct4对P53启动子存在调控作用。为了检测在低剂量力达霉素抑制P19细胞生长的过程中有无细胞凋亡的发生，我们先采用流式细胞分析技术用AnnexinV/PI双染色方法检测了经低剂量力达霉素处理的P19细胞中是否存在细胞凋亡，结果显示未检测到细胞凋亡的发生。同时分别采用Western blot和RT-qPCR的方法在蛋白质和mRNA水平检测了该过程中几种促凋亡蛋白的变化，结果显示随着药物作用时间的延长，促凋亡蛋白未出现明显的变化。由上面的试验结果我们得出：低剂量力达霉素抑制小鼠胚胎癌细胞P19生长是通过影响细胞周期实现的，且其抑制作用是由于该药物使Oct4表达下调，进而调控P53蛋白表达增强，从而影响了细胞周期蛋白P21导致细胞周期阻滞的发生。低剂量力达霉素抑制小鼠P19细胞生长的过程中未发生细胞凋亡。