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背景:近年来研究表明局麻药通过不同机制发挥抗肿瘤作用。罗哌卡因是一种新型长效的酰胺类局部麻醉药,一般用于局部浸润麻醉、椎管内麻醉、区域神经阻滞及术后镇痛。随着局麻药抗肿瘤作用的研究深入,罗哌卡因的抗肿瘤作用越来越引起学者的研究兴趣。目的:观察罗哌卡因对人肝癌Sk-hep-1细胞株增殖和凋亡的影响并探讨其抗肿瘤作用机制。方法:实验利用MTT法检测对照组,400μM,800μM,1200μM罗哌卡因处理人肝癌Sk-hep-1细胞株和人正常肝细胞L-02细胞株24h后,观察细胞毒性作用;选择400μM,800μM,1200μM罗哌卡因处理人肝癌Sk-hep-1细胞株24h,48h和72h后观察细胞存活率变化;不同浓度的罗哌卡因(400μM,800μM,1200μM)作用于人肝癌Sk-hep-1细胞24 h后,应用DAPI核染色法,观察人肝癌Sk-hep-1细胞发生凋亡时形态学变化;400μM,800μM,1200μM罗哌卡因处理人肝癌Sk-hep-1细胞24h后,蛋白免疫印迹法检测罗脈卡因对Cleaved caspase-3、Cleaved Caspase-9、Bcl-2、Bax、Cyt-c等调亡相关蛋白表达的影响。结果:(1)MTT实验结果显示400μM,800μM,1200μM罗哌卡因无细胞毒性作用,对正常肝细胞存活率无明显影响(P>0.05)。与对照组比较,400μM,800μM,1200μM罗哌卡因作用于人肝癌Sk-hep-1细胞24 h,48 h和72 h后均能明显抑制细胞存活率(P<0.05,P<0.01,P<001),处理24 h罗哌卡因的IC50值为1303μM,但处理不同时间点同浓度比较无统计学意义(P>0.05)。(2)与对照组比较,400μM,800μM,1200μM罗哌卡因干预24h后,人肝癌Sk-hep-1细胞核出现萎缩、碎裂、核边集等细胞凋亡形态变化。(3)不同浓度罗哌卡因作用于人肝癌Sk-hep-1细胞24h后,与对照组相比,细胞凋亡相关因子Bax、Cleaved caspase-3、Cleaved Caspase-9和Cyt-c等蛋白表达水平明显上调(P<0.01),而细胞凋亡抑制蛋白Bcl-2表达水平明显下降(P<0.01),变化趋势呈现一定的浓度依赖关系。结论:(1)罗哌卡因对人肝癌细胞株Sk-hep-1有显著的生长抑制作用,该生长抑制作用与罗哌卡因诱导肝肿瘤细胞凋亡有关。(2)罗哌卡因诱导凋亡的机制可能与激活线粒体介导的凋亡通路诱导Sk-hep-1细胞凋亡有关。