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研究背景子宫内膜癌是发生于子宫内膜的上皮性恶性肿瘤,其发生除了与雌、孕激素相关,还与原癌基因的异常表达及抑癌基因的缺失密切相关。microRNA（miRNA）是约20～25个核苷酸长度的具有调控功能的非编码小RNA,能通过与靶基因的mRNA碱基互补配对,从而在转录后水平导致mRNA的降解或抑制靶蛋白的翻译,进而参与调控肿瘤的发生发展。SNAI1基因家族是由具有锌指结构的转录抑制因子组成的家族,已有研究表明SNAI1基因的异常表达促进肿瘤的发生发展。目的本课题组前期在子宫内膜癌细胞中通过芯片数据分析得到候选抑癌miRNA——miR-4286,本研究探讨miR-4286在子宫内膜癌组织中的表达,研究其在抑制子宫内膜癌细胞发生发展中的分子机制,从而为子宫内膜癌的临床诊治提供新的线索,为寻找子宫内膜癌新的治疗靶点奠定分子生物学基础。研究内容和方法1、在体外细胞水平应用MTT实验、EDU实验、Transwell小室迁移实验、Boyden小室侵袭实验研究miR-4286对子宫内膜癌细胞的影响2、在动物体内水平应用裸鼠皮下成瘤模型、裸鼠肝包膜转移模型研究miR-4286对子宫内膜癌细胞的影响3、初步探讨miR-4286抑制子宫内膜癌细胞增殖及侵袭转移的分子机制4、利用生物信息学、荧光定量PCR、Western blot、免疫组化、双荧光素酶报告基因确定miR-4286的靶基因5、研究miR-4286在子宫内膜癌组织中的表达特性及与患者临床病理因素之间的关系结果1、MTT实验、EDU实验、Transwell小室迁移实验、Boyden小室侵袭实验证实:在体外细胞水平,miR-4286能抑制子宫内膜癌细胞增殖和侵袭转移能力。2、裸鼠皮下成瘤模型及裸鼠肝包膜转移模型实验证实:在体内动物水平,miR-4286也能抑制子宫内膜癌细胞的增殖和侵袭转移能力。3、Western blot实验显示:过表达miR-4286后子宫内膜癌细胞中增殖信号通路蛋白CCND1、p-PI3K、p-Akt表达下调,PI3K、AKT的表达水平无明显变化;侵袭转移（EMT）信号通路蛋白E-Cadherin上调,ZEB1、N-Cadherin、β-catenin、vimentin、slug 下调。4、利用生物信息学、荧光定量PCR、Western blot、免疫组化、双荧光素酶报告基因确定SNAI1是miR-4286的靶基因。5、原位杂交结果显示miR-4286在子宫内膜癌组织中呈低表达,其表达与患者淋巴结转移状态及FIGO分期（Ⅰ-Ⅱ期vs Ⅲ-Ⅳ期）有统计学差异。结论本研究在体外细胞功能实验及动物体内实验证实miR-4286能抑制子宫内膜癌细胞增殖和侵袭转移能力;而且miR-4286是通过靶向SNAI1引起增殖与侵袭转移信号通路的改变,从而抑制子宫内膜癌细胞的增殖和侵袭转移;miR-4286在子宫内膜癌组织中呈低表达,且与患者的淋巴结转移状态及FIGO分期有统计学差异。