【摘 要】
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使用对峙培养法从土壤、昆虫等样品中分离筛选到31株对扩展青霉具有不同程度抑制作用的芽孢杆菌,通过表型、全细胞蛋白SDS-PAGE、16SrDNA序列测定方法对其进行鉴定,H195等6个菌
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使用对峙培养法从土壤、昆虫等样品中分离筛选到31株对扩展青霉具有不同程度抑制作用的芽孢杆菌,通过表型、全细胞蛋白SDS-PAGE、16SrDNA序列测定方法对其进行鉴定,H195等6个菌株为地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis),H11为短小芽孢杆菌(B.pumilus)、H161为枯草芽孢杆菌(B.subtilis)、HT16为多粘类芽孢杆菌(Paenibacilluspolymyxa),HT11等22个菌株为同一个种并位于枯草芽孢杆菌所在进化分枝中,未能准确鉴定。
测量了31个菌株在不同温度下的抑菌能力,所有菌株的抑菌能力与温度正相关,HT16菌株在较低温度(15℃、25℃)下抑菌能力最高,HT16和枯草芽孢杆菌进化分枝中某些菌株在较高温度(37℃)下具有很好的抑菌能力;地衣芽孢杆菌的菌株在较低温度下无抑菌能力,较高温度下抑菌能力较弱,短小芽孢杆菌H11的抑菌能力较弱但随温度变化较小。在20℃下,多粘类芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌进化分枝中菌株对扩展青霉菌丝生长抑制率为10.9%-42.2%,其中H137菌株抑制率最高。在苹果汁平板上,包括HT16、H137菌株在内的某些菌株无抑菌能力,培养基成分对菌株抑菌能力有很大影响。
对多粘类芽孢杆菌HT16产抑菌蛋白的条件、性质进行了初步研究,HT16产抑菌蛋白需要真菌中某些成分的诱导,茯苓菌核是较好的诱导物质,茯苓粉培养基中加入葡萄糖、硫酸铵降低了发酵液抑菌活性,对茯苓粉浓度、氮源浓度、发酵时间作了初步研究。HT16菌株在茯苓粉培养基中产生的抑菌蛋白具有极好热稳定性,121℃处理15min活性不变;pH3.0-9.0下活性不变,pH10.2时活性全部丧失;蛋白酶处理后抑菌能力有一定下降但无显著差异。利用热处理除去大量杂蛋白后使用10kD超滤管纯化该蛋白,Tricine-SDS-PAGE显示分子量约为4.5kD。
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