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目的：研究胆结石候选基因是否存在DNA甲基化,筛检DNA甲基化位点。方法：取25例胆囊结石病员(GS组)、35例肝胆管结石(HS组)及25例非胆石病人(对照组)肝组织,均提取DNA,分别采用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation-specific PCR,MSP)法,检测肝组织SR-BI, CYP7A1,HCM-COAR,BSEP等基因启动子的甲基化状况,筛选DNA甲基化位点。DNA经变性后采用亚硫酸氢钠硫化处理,使DNA中未甲基化的胞嘧啶转化为胸腺嘧啶,经PCR扩增、琼脂糖电泳检测DNA甲基化情况。两组病员手术中取得的胆结石,用流动自来水充分冲洗后,再用蒸馏水冲洗一次,放置干净的纱布上,任其自行完全干燥。将胆石标本置研钵中研成粉末,再放入干燥器中干燥三天恒重后,精确称取质量,进行定量化学分析,用乙醚提取胆固醇,以三氯化铁硫酸显色法显色,用分光光度计测定胆固醇含量,确定结石性质。结果：基因SRBI在胆囊结石组甲基化率为8.0%(2/25),在肝胆管结石组和非结石组分别为8.0%(3/35)和28%(7/25),三者比较,差异无统计学意义(X2=5.61,P>0.05),三组间两两比较,肝胆管结石与非结石组比较,X2=4.9,P<0.05,有统计学意义,肝胆管结石组甲基化率低于非结石组病人,胆囊结石组与非结石组比较,X2=1.5,P>0.05,差异无统计学意义,结石组与非结石组两组间X2=4.1,P<0.05,有统计学意义,即结石组甲基化率低于非结石组。BSEP在胆囊结石病人中甲基化率为24.0%(6/25),在肝胆管结石组病人中甲基化率为37.1%(13/35)，总的结石组甲基化率31.7%(19/60),在非结石组为12.0%(3/25),肝胆管结石,胆囊结石和非结石组比较，X2=11.7,P<0.05,三者之间差异有统计学意义,三组间甲基化率存在差异,肝胆管结石组病人甲基化率高于非结石组,三组间两两比较,肝胆管结石与非结石组统计学参数X2=3.52,P>0.05,差异无统计学意义。结石组与非结石组的BSEP甲基化统计参数值X2=2.61,P>0.05,差异无统计学意义,胆囊结石组与非结石组比较也无统计学意义。HMG-COA和CYP7A1甲基化情况在胆囊结石、肝胆管结石和非结石三组间,两两比较间比较中,均无统计学意义。结论：胆结石形成过程中,胆结石候选基因甲基化的改变可能是其重要原因之一,本实验研究发现,胆结石病人BSEP基因出现高甲基化,SRBI出现低甲基化,BSEP基因的高甲基化可以导致其自身表达下调,SRBI的低甲基化可以使其自身表达上调,二者均可导致胆汁中胆固醇比例的增加,利于结石的形成。