八氯腺苷(8-Cl-Ado)是一种腺苷衍生物，可抑制肿瘤细胞生长，但其作用机制目前尚不十分清楚。细胞周期阻滞和凋亡被认为是这一效应的直接原因。但是，关于8-Cl-Ado引起细胞周期阻滞的相关报道颇不统一。有文献证明，8-Cl-Ado可引起靶细胞发生G1或Gl-S期阻滞；另有文献报道G2/M期阻滞；甚至有报道说，靶细胞首先发生G1或Gl-S期阻滞，随8-Cl-Ado作用时间延长继而发生G2/M期阻滞。为探索8-Cl-Ado的抗肿瘤作用机制，本研究以神经母细胞瘤SH-SY5Y和SK-N-SH细胞为对象，首先采用四唑盐比色实验(MTT法)证明，8-Cl-Ado具有明显的抑制肿瘤细胞增殖的作用，这种抑制作用呈剂量-时间依赖性。流式细胞分析显示，10μmol/L8-Cl-Ado作用24-48h后可导致靶细胞生长停滞于G2/M期；SH-SY5Y细胞24-48h后发生明显细胞凋亡，但SK-N-SH细胞却未见凋亡。Hoechst33342染色显示，SK-N-SH细胞发生了核分裂异常。蛋白质免疫印迹分析证明，10μmol/L8-Cl-Ado处理SH-SY5Y细胞48-72h后，G2检验点调节蛋白ATM、Chkl、Cdc25C和Cdc2磷酸化形式及p53明显上调，同时伴有caspase-3的激活，提示SH-SY5Y细胞发生了G2检验点通路和细胞凋亡途径的激活。与SH-SY5Y细胞不同，在SK-N-SH细胞中，8-Cl-Ado处理72-96h后，磷酸化ATM、磷酸化Chk1/Chk2、磷酸化Cdc25C以及磷酸化Cdc2的水平变化呈现逐渐降低的趋势，结果提示SK-N-SH细胞在8-Cl-Ado处理后发生了G2检验点失败。蛋白质免疫印迹分析还显示，8-Cl-Ado可诱导p53在SH-SY5Y细胞的表达，但却不能影响SK-N-SH细胞的p53组成性表达水平。p21Waf1/Cip1/Sdi1在SK-N-SH的组成性表达随8-Cl-Ado处理时间延长而逐渐减少，但在处理前后的SH-SY5Y细胞均未检测到p21Waf1/Cip1/Sdi1蛋白的表达。这些实验结果证明，8-Cl-Ado抑制两种细胞增殖的机制不同：在SH-SY5Y细胞，8-Cl-Ado可激活ATM-Chk-Cdc25C-Cdc2途径和凋亡机制，使细胞发生G2/M期阻滞和细胞凋亡；在SK-N-SH细胞，8-Cl-Ado诱导G2检验点失败，导致细胞阻滞在M期，并发生有丝分裂异常。两种不同的细胞命运可能还与p53和p21Waf1/Cip1/Sdi表达不同有关。